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通过3对兼并性引物扩增获得与S.sclerotiorum抗药性相关的β-微管蛋白基因，全长1 685 bp，包含4个内元，相应的编码447个氨基酸。该基因与其它6种线状真菌的β-微管蛋白基因相比，氨基酸序列同源性达95.78%～97.66%，但内元数目和大小不同。比较S.sclerotiorum敏感型和抗药性菌株的β-微管蛋白基因，发现该基因第198位氨基酸由谷氨酸突变为丙氨酸，从而导致田间抗药性的产生。为了快速、准确监测田间抗药性频率，根据S.sclerotiorumβ-微管蛋白基因的突变位点设计了2对等位基因特异性寡核苷酸（ASO），直接以菌核的基因组DNA为模板扩增，所需时间约为6 h，抗药性检出率为100%，与传统菌丝直径法的测定结果相比检测准确率为96%，而传统的检测方法至少需要1～2周。 相似文献
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