桑悬浮细胞原生质体培养的研究   总被引：2，自引：1，他引：1  

陈爱玉  王勇 《蚕业科学》1993,19(3):135-138

采用继代培养三个月后的桑子叶悬浮细胞为材料,进行了原生质体的分离和培养。桑悬浮细胞在纤维素酶、果胶酶、半纤维素酶的混合溶液中,酶解获得产量高、活力强的原生质体。原生质体在K8p(附加6—BA、NAA、2,4—D、LH)液体培养基中,再生细胞经多次分裂,得到肉眼可见的小愈伤组织。再通过增殖继代培养,获得浅黄色、具有明显颗粒结构的愈伤组织,转至各种激素含量的MSB固体培养基中,尚未获得绿苗分化。  相似文献   

草莓悬浮细胞原生质体培养再生愈伤组织   总被引：4，自引：0，他引：4  

周春江  李卫东  葛会波 《果树学报》2003,20(4):319-321

以草毒品种宝交早生的花药愈伤组织建立的悬浮细胞系为试材,对原生质体分离和再生进行研究。结果表明:酶液的渗透压、浓度和配比对悬浮细胞原生质体产量和活力有重要的影响。悬浮细胞在CPW+1.0％ Cellulase R-10+0.5 Macerozyme R-10+0.05％Pectolyase Y-23+0.6mol/L甘露醇+0.5％PVP的酶液中酶解12h,原生质体产量和活力最高,分别达16.35×10~6/g和84.6％。采用液体浅层培养法对原生质体进行培养获得了再生愈伤组织。  相似文献   

茶薪菇原生质体制备及诱变的研究   总被引：8，自引：0，他引：8  

张渊  王谦  张筱梅  张焕英 《中国食用菌》2004,23(3):15-17

对茶薪菇原生质体的分离及再生进行研究 ,结果表明以溶壁酶的去壁效果最好 ,不同酶组合可提高去壁效果 ,酶解液在 2 0 %时原生质体释放量很高。酶解适宜温度为 30℃ ,培养 4～ 5d的菌丝酶解 3h释放的原生质体最多。以甘露醇作为渗透压稳定剂 ,原生质体的释放量及再生率均较高 ,再生率达到 5 %左右 ,经紫外线照射 2 0s,致死率即达 70 %以上  相似文献   

柱花草叶肉原生质体提取与瞬时表达体系构建     

高静  杨丽云  张世子  蒋凌雁 《草地学报》2023,31(3):893-902

柱花草(Stylosanthes guianensis)是一种重要的热区豆科牧草,为利用原生质体瞬时表达体系开展柱花草基因功能研究,以20 d龄期‘热研5号’柱花草子叶为试验材料,通过正交试验考察不同因素对原生质体分离及转化效率的影响。结果表明：采用1.5%纤维素酶、1.25%离析酶、0.5 mol·L^-1甘露醇和4 mmol·L^-1MES酶解液组合,酶解时间为16 h时,原生质体的产量和活性均达到最佳,分别为(4.567×10⁶)个·g^-1和92.271%;原生质体浓度为(6×10⁵)个·mL^-1、质粒浓度为0.6μg·μL^-1,PEG-4000浓度为50%、转化时间为5 min时,转化效率最高,可达52.524%。构建了目标蛋白SgRKL1表达载体pA7-BIUTNT::SgRKL1-GFP,利用PEG介导法将其转入柱花草原生质体,激光扫描共聚焦显微镜检测结果显示SgRKL1蛋白定位于细胞膜上,说明所建立的柱花草叶肉原生质体瞬时表...  相似文献   

苎麻悬浮细胞原生质体培养再生植株   总被引：5，自引：0，他引：5  

陈喜文  陈德富 《作物学报》1996,22(1):112-116

苎麻品种浏阳大叶绿的子叶在含有２，４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ、ＫＴ０．５ｍｇ／Ｌ的ＭＳＢ固体培养基上，形成愈伤组织。愈伤组织经３￣４次继代培养后作液体振荡培养，产生悬浮细胞系。从悬浮系分离的原生质体，只有以海藻酸钠包埋方式培养在ＫＭ８Ｐ培养基中，５０天左右才能形成肉眼可见的小愈伤组织。该愈伤组织在附加２，４－Ｄ０．２ｍｇ／Ｌ、６－ＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ的ＭＳＢ生长培养基上增殖，然后转入附加６－ＢＡ２．０ｍｇ  相似文献   

原生质体载体技术在马铃薯育种中的应用     

张延红  何春雨  谢从华  于品华  柳俊 《中国农学通报》2005,21(9):43-46

综述了原生质体载体技术在育种中的应用:体细胞杂交、以原生质体为受体细胞的DNA直接导入转化、体细胞无性系变异、胁迫耐受系的选择,同时针对马铃薯的生物学特性、育种现状及其原生质体方面的研究现状,提出利用原生质体载体技术进行马铃薯育种的优势和切实可行性。  相似文献   

农抗SH—62产生菌原生质体再生菌株的筛选和再生菌株R-4发酵规律的初步研究     

周向东  梁蓉芳 《华中农业大学学报》1986,(4)

本文报道了农抗SH—62产生菌原生质体再生菌株的筛选和再生菌株R—4的发酵规律。试验表明,通过摇瓶的初筛和复筛,从活性比出发菌株要强的202株再生菌株中,找出R—4、R—66和R—72三株活性最强而又稳定的再生菌株。在再生菌株R—4的发酵试验中,选出了该菌株的最佳发酵培养基为1号培养基,并证明这个菌株对溶氧量并不敏感,在偏碱条件下有利于生长和产素,发酵周期为72小时等最适发酵条件。  相似文献   

我国蔬菜原生质体培养研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨向晖  徐跃进 《长江蔬菜》1998,(10):1-4

综述了国内学者对蔬菜原生质体培养包括原生质体的来源和预处理,原生质体的分离和培养,再生植株的获得以及原生质体融合等方面的研究进展。  相似文献   

灵芝原生质体形成与再生的研究   总被引：1，自引：1，他引：0  

董昌金  王卫东 《中国食用菌》1999,18(1):8-9

该文通过对原生质体形成与再生条件如酶类、渗透压稳定剂、ｐＨ、培养基、菌龄、酶解温度和时间等因素的研究表明，以Ｄ培养基、葡萄糖为渗透压稳定剂，酶液浓度为１５％Ｌｙｗ＋０２％Ｌｙｓ，ｐＨ４５～５５，培养菌龄为７２～９６ｈ，酶解温度为２０～２５℃条件下，酶解６０～９０ｍｉｎ，其破壁效果为最佳，原生质体形成和再生率都最高。  相似文献   

小叶杨原生质体培养植株再生及其同工酶的变化   总被引：4，自引：2，他引：4  

王影  黄敏仁  陈道明  卫志明  孙勇如 《林业科学》1995,31(4):310-318,T001

从小叶杨（Ｐｏｐｕｌｕｓｓｉｍｏｎｉｉ）胚性悬浮细胞分离得到大量有活力的原生质体，产量高达３．８×１０７ｇ－１ＦＷ。高密度（３×１０６／ｍＬ）液体浅层培养可促进小叶杨原生质体的分裂和生长；以葡萄糖为唯一碳源的Ｋｍ８ｐ培养基，有利于原生质体的持续分裂；在培养基中添加有机氮，有助于提高原生质体的植板率。原生质体形成细胞团后，逐步降渗和分皿培养，能有效促进细胞团的持续分裂。愈伤组织在不同分化培养基上的分化频率存在着明显的差异，同工酶分析说明，分化能力强的愈伤组织，其ＴＣＡ循环和磷酸戊糖途径较为活跃，ＧＯＴ、ＥＳＴ和ＰＥＲＯＸ的活性比较高。当芽伸长到２—３ｃｍ时，从基部切下转移到无激素的１／２ＭＳ培养基上诱导生根并形成完整植株。移入盒内，在温室生长良好。  相似文献