Haemolymph metabolic variables in relation to eyestalk ablation and gonad development of Pacific white shrimp Litopenaeus vannamei Boone     

G F Arcos  A M Ibarra  C Vazquez-Boucard  E Palacios  & I S Racotta 《Aquaculture Research》2003,34(9):749-755

The present study analyses some biochemical variables in haemolymph proposed as predictive indicators of the maturation capability following eyestalk ablation. Haemolymph of captive females was obtained before and 8 days after eyestalk ablation, and levels of haemocyanin, total proteins, glucose, lactate, cholesterol, triacylglycerides and vitellogenin were determined. Biochemical variables were also analysed in the hepatopancreas at the end of the experiment. Females were grouped as immature (previtellogenic stage) and mature (vitellogenic and cortical stages) based on histological analysis done 8 days after eyestalk ablation. To analyse haemolymph variables before eyestalk ablation in relation to maturation capability, immature females were classified as those with a low maturation capability and mature females as those with a high maturation capability. Females of high maturation capability had significantly higher vitellogenin levels before eyestalk ablation than females of low maturation capability. No significant differences were found for the other biochemical variables. Vitellogenin was also higher in mature than in immature females at the end of the experiment. These results indicate that vitellogenin levels in haemolymph could be used as possible predictive criteria of maturation capability, possibly because they reflect the degree of ovarian development at the time of eyestalk ablation.  相似文献   

Purification and characterization of two anionic trypsins from the hepatopancreas of carp   总被引：8，自引：0，他引：8  

Min-Jie Cao  Kiyoshi Osatomi  Miho Suzuki  Kenji Hara  Katsuyasu Tachibana and  Tadashi Ishihara 《Fisheries Science》2000,66(6):1172-1179

SUMMARY: Two trypsins, designated as trypsin A and trypsin B, have been purified from the hepatopancreas of carp. The purification procedures consisted of ammonium sulfate fractionation, and chromatographies on DEAE-Sephacel, Ultrogel AcA54 and Q-Sepharose. Trypsin A was purified to homogeneity with the molecular mass of approximately 28 kDa, while trypsin B gave two close bands of 28.5 kDa and 28 kDa on sodium dodecylsulfate polyacrylamide gel electrophoresis both under reducing and non-reducing conditions. On native-PAGE, both trypsin A and trypsin B showed a single band. Trypsin A and trypsin B revealed optimum temperature of 40°C and 45°C, respectively, and shared the same optimum pH 9.0 using Boc-Phe-Ser-Arg-MCA as substrate. Both enzymes were effectively inhibited by trypsin inhibitors and their susceptibilities were similar. The NH₂-terminal amino acid sequences of trypsin A and trypsin B were determined to 37th and 40th amino acid residue, respectively. Their sequences were very homologous, but not identical to that of a trypsin-type serine proteinase from carp muscle and these of other trypsins. Immunoblotting test using the antibody raised against trypsin A cross-reacted with trypsin B positively.  相似文献   

绿原酸诱导凡纳滨对虾抗氧化功能及抵御低盐度胁迫的响应   总被引：1，自引：0，他引：1  

王芸  李健  李正  牛津  王珺  黄忠  林黑着 《中国水产科学》2014,21(2):340-350

选择健康、均匀, 体质量为(6.74 ± 0.08) g的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei),  将360尾随机分为4组, 分别投喂含有0 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg和400 mg/kg绿原酸的饲料28 d, 随后将对虾从盐度为32的天然海水直接转移至盐度为10的海水中暴露72 h, 测定对虾肝胰腺TAS、GPx、CAT活力和GPx、CAT基因表达水平。结果显示, 在天然海水养殖条件下, 绿原酸对凡纳滨对虾肝胰腺TAS、GPx活性无明显影响, 但投喂含有绿原酸的饲料28 d, 对虾肝胰腺GPx、CAT和GPx、CAT基因表达水平显著高于D0组(P<0.05), 以D2组GPx活性和GPx、CAT基因表达水平最高, 分别为164.29 U/mgprot和1.61、2.14倍。低盐度胁迫24 h, D0组对虾抗氧化反应表现在TAS、GPx活性和GPx基因表达水平较28 d显著升高(P<0.05), 分别增加了31.30%、27.96%和170%, 而绿原酸各组对虾肝胰腺TAS、GPx活性和GPx基因表达水平显著低于D0组(P<0.05), 说明绿原酸可有效缓解低盐度胁迫下对虾抗氧化系统酶活性的剧烈波动。低盐度胁迫72 h, 绿原酸各组对虾肝胰腺TAS、GPx、CAT活性及CAT基因表达水平均明显高于D0组。上述结果表明绿原酸能够诱导凡纳滨对虾的抗氧化系统功能, 在凡纳滨对虾抵抗低盐度胁迫中发挥着重要的作用。本研究旨为开发绿色植物提取物在对虾养殖中的应用, 解决盐度胁迫对机体造成的氧化损伤提供理论依据。

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中华绒螯蟹蜕皮周期及蜕皮过程中肝胰腺消化酶活性的变化   总被引：5，自引：1，他引：5  

康现江  田志环  吴江立  穆淑梅 《中国水产科学》2012,19(5):806-812

采用Darch蜕皮周期分期方法,对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)的蜕皮周期进行了划分,并初步探讨了中华绒螯蟹蜕皮过程中肝胰腺消化酶活性变化。根据第三颚足末端刚毛和表皮的形态学特征,可将中华绒螯蟹的蜕皮周期分为蜕皮后期(A-B期)、蜕皮间期(C期)、蜕皮前期(D期)和蜕皮期(E期),其中D期可进一步分为D0、D1、D3-43个亚期。在蜕皮过程中,肝胰腺淀粉酶和胰蛋白酶活性在蜕皮后A-B期开始升高,于蜕皮前早期D0阶段达最大(P<0.05),随后又逐渐降低,至蜕皮前晚期D3-4阶段降至最低(P<0.05);胃蛋白酶活力在蜕皮周期中于蜕皮前晚期D3-4阶段显著降低(P<0.05),其他阶段变化不明显(P>0.05)。结论认为,中华绒螯蟹蜕皮过程可分为C、D0、D1、D3-4、A-B 5个时期,蜕皮过程中肝胰腺淀粉酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶活性发生周期性变化。  相似文献   

三唑磷对斑节对虾肝胰腺和鳃的氧化胁迫效应     

李红艳  张结  陈海刚  马胜伟  陈炜婷  王涛  蔡文贵 《农业环境保护》2013,(12):2345-2351

采用半静态毒性实验方法测定了三唑磷（Triazophos,OP）对斑节对虾（Penaeusmonodon）的96hLC卯值,同时研究了低（0．3μg·L^-1）、中（0．5μg·L^-1）、高（1μg·L^-1）浓度OP胁迫1、3、7、14d和清水恢复7d后斑节对虾肝胰腺和鳃中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）、丙二醛（MDA）含量和总抗氧化能力（T—AOC）的变化趋势。结果表明：在胁迫期间SOD、GPx活性都受到了显著的诱导和抑制,呈一定的变化规律;MDA含量随胁迫时间延长显著升高。肝胰腺T—AOC在低浓度OP胁迫下呈升高-下降-升高的变化趋势,高浓度则显著下降;鳃T—AOC显著升高,而随胁迫时间延长,T—AOC显著降低。经清水恢复7d后,各浓度组肝胰腺SOD活性仍然显著低于空白组,MDA含量和T-AOC显著高于空白组。低浓度组鳃SOD、T—AOC显著高于空白组,MDA含量和中、高浓度SOD能恢复到正常水平,T—AOC则显著低于空白组。肝胰腺和鳃GPx活性变化情况相同,均为低、中浓度显著升高,高浓度显著下降。上述结果显示,0P对斑节对虾的抗氧化系统有显著的影响,且具有组织特异性,肝胰腺对OP较为敏感。斑节对虾对一定浓度OP所带来的氧化损伤具有一定的自我修复能力,但在短期内无法完全修复。  相似文献   

氧化鱼油对鲤肝胰脏抗氧化机能   总被引：5，自引：1，他引：5  

任泽林  曾虹  霍启光  周文豪  范志影 《大连水产学院学报》2000,15(4):235-243

在半纯化饲料中添加质量分数为３％的新鲜鱼油（过氧化物值ＰＯＶ为０．６４ｍｍｏｌ／ｋｇ）和ＰＯＶ分别为２９．６４、５９．４０和９４．６９ｍｍｏｌ／ｋｇ（以Ｏ２计）的氧化鱼油,投喂１００ｇ左右２龄鲤（Ｃｙｐｒｉｎｕｓ ｃａｒｐｉｏ）鱼种１５周,结果表明：鲤摄食氧化鱼油后,肝胰脏维生素Ｅ含量下降（Ｐ〈０．０５）,抗氧化酶超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性减弱（Ｐ〉０．０５）,微粒体氧化稳定性降低（Ｐ〈０．０５）,鱼渔氧化程度升高,上述变化加强;肝胰脏脂肪含量增加（Ｐ〉０．０５）;肾脏和脾脏增生（Ｐ〉０．０５）;肝胰脏肝细胞纤维化、线粒体嵴降解和融合。上述系列变化表明氧化钱油可以破坏鲤肝胰脏抗氧化机能及其正常的组织结构。  相似文献   

宝石鲈肝胰脏蛋白质双向电泳方法的摸索与优化     

周鹏  宋立伟  白东清  孙向军  齐野  乔秀亭 《天津农学院学报》2013,(2):15-17,21

选取宝石鲈肝胰脏作为样品,通过优化裂解配方及摸索裂解液与样品的最适比例,设计两个等电聚焦程序,建立和优化宝石鲈鱼肝胰脏蛋白质双向电泳实验方法,为宝石鲈肝胰脏内目标蛋白的研究提供参考。结果表明,采用裂解液配方:8 M Urea,2 M Thiourea,0.5%(W:V)CHAPS,40 mMTris-Base,1%DTT,2%(W:V)Pharmalyte pH 3～10,1 mM PMSF;裂解液和样品液比为1∶3时裂解效果较好;等电聚焦程序I(S1:0～500 V,500 V.h;S2∶500 V,500 V.h;S3∶500～3 500 V,10 000V.h;S4∶3 500 V,50 000 V.h,S5∶3 500～5 000 V,8 000 V.h)具有最好的等电聚焦效果。  相似文献   

草鱼幼鱼肝胰脏抗氧化系统对MC-LR胁迫的响应     

隗黎丽  何丽  阮记明  刘毅  付建平  钟其旺 《农业环境科学学报》2019,38(1):44-50

为了研究微囊藻毒素(MC-LR)对草鱼(Ctenopharygodon idella)幼鱼肝胰脏抗氧化防御系统的影响,本研究通过腹腔注射的方法(剂量为25、100μg MC-LR·kg-1,分别称为低剂量和高剂量),对草鱼幼鱼进行染毒,于胁迫24、48 h和72 h后分离其肝胰脏,随后采用分光光度法检测了草鱼幼鱼肝胰脏中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性;同时采用荧光定量PCR方法分析了SOD、CAT、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和谷胱甘肽还原酶(GR)基因相对表达量的变化。结果显示:高剂量MC-LR诱导24 h和48 h后,草鱼幼鱼肝胰脏SOD活性显著增加(P0.05),而SOD在低剂量组中活性没有显著变化(P0.05);低剂量MC-LR对CAT活性没有显著影响(P0.05),而高剂量MC-LR诱导24 h后可使草鱼幼鱼肝胰脏CAT活性显著增加(P0.05),随后其活性又下降,但差异不显著(P0.05)。在MC-LR胁迫过程中,SOD、CAT、GPx基因表达在两个剂量组中均显著低于对照组(P0.05),而GR基因在低剂量MC-LR胁迫24 h后相对表达量显著上调(P0.05),尽管在72 h相对表达量上调,但差异不显著(P0.05),而高剂量组中GR基因在胁迫24 h和48 h后,其表达量被抑制,但不存在显著差异(P0.05)。进行抗氧化酶活性和基因表达相关性分析发现,SOD和CAT酶活性与SOD和CAT基因表达不相关。上述研究表明MC-LR对草鱼幼鱼肝胰脏抗氧化系统产生了明显的胁迫效应,但MC-LR对机体抗氧化酶活性与基因编码调控之间的相互作用机制还有待更深入的研究。  相似文献   

致对虾肝胰腺坏死病副溶血弧菌荧光定量PCR检测方法的建立     

陈平亚  张亮亮  吴少荣  黄纪徽  王绥家  吴山楠 《广东农业科学》2021,48(11):119-125

【目的】建立一种对虾急性肝胰腺坏死病（Acute Hepatopancreatic Necrosis Disease）病原菌副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus, VpAHPND）荧光定量 PCR 检测方法,对该病进行快速检测。【方法】根据副溶血弧菌基因保守序列设计特异性引物和探针,经优化反应体系及条件,建立检测 VpAHPND 的荧光定量 PCR 方法;以重组质粒为标准品制作标准曲线,并进行特异性、敏感性、重复性及临床应用试验。【结果】该方法定量范围宽,起始模板浓度范围为 2.3×101 ~2.3×107 拷贝 /μL 时,标准曲线具有良好的线性关系;最低检测限为 2.3 拷贝/μL,与对虾其他病原菌及病毒无交叉反应,重复试验变异系数为 0.45%~0.69%,可在 1 h 内完成样品检测;对临床对虾样品的检测结果表明,该方法与世界动物卫生组织（OIE）推荐的套式 PCR 法检测结果一致。【结论】应用 TaqMan 探针建立的检测 VpAHPND 的荧光定量 PCR 方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,可有效用于临床对虾样品的 VpAHPND 检测。  相似文献   

灌喂必需氨基酸模式溶液对草鱼全鱼_省略_肌肉_肝胰脏蛋白质合成代谢的影响   总被引：6，自引：1，他引：6  

罗莉 《水产学报》2002,26(1):73-78

采用大剂量食道灌喂DL－[4-^3H]-Phe，研究不同EAA模式下，20－30g体重草鱼种的全鱼和肌肉，肝胰脏的蛋白质合成代谢，结果表明：（1）分别缺乏Lys,Met,Trp Arg的4种极端不平衡EAA模式，同草鱼肌肉EAA模式即相对平衡的基础模式相比，肌肉，肝胰脏及全鱼的蛋白质合成速率（FSR）均显著降低，其降低程度高低依次为Met,Lys,Arg,Trp;(2)肝胰脏，肌肉人的蛋白质合成代谢与整体蛋白质合成代谢对EAA模式的改变产生相同的变化趋势，并且三者蛋白质合成代谢速率为肝胰脏＞全鱼＞肌肉；（3）EAA模式的Lys,Met,Trp,Arg4因素中，对肌肉，肝胰脏蛋白质合成速率影响最大的是Met,其余依次为Lys,Arg,Trp。  相似文献