Nuclear transfer in loach (Paramisgurnus dabryanus Sauvage) by cell-to-cell electrofusion     

F Hongtuo  & W Chingjiang  . 《Aquaculture Research》2001,32(4):267-275

To study nuclear transfer in the loach (Paramisgurnus dabryanus Sauvage), blastula and gastrula cells were fused with UV-inactivated oocytes by cell-to-cell electrofusion. To facilitate nuclear transfer, blastula and gastrula cells were cultured or incubated at 4 °C in different solutions. TC-199 medium supplemented with 20% calf serum was the best culture solution, and effectively retained the totipotence of blastula or gastrula cells for up to 10 days. It was found that gastrula cells incubated at 4 °C had the same totipotence as blastula cells. The optimal UV dosage for inactivation of the oocyte chromatin was 180–240 mJ cm⁻². Electrofusion was carried out in a cone-shaped fusion chamber, which permitted the recipient oocyte and the donor blastula cell to contact one another. The electrofusion procedure resulted in a 10% success rate of normal-appearing fish. Genetic analysis indicated that the nuclear material originated from the donor cell (blastomere) and the oocyte pronucleus did not take part in development.  相似文献   

秋水仙素诱变对桑黄菌丝生长及活性成分的影响     

杨佳乐  范桂枝  张李香 《北方园艺》2021,(7):110-116

以1.0%纤维素酶和0.5%蜗牛酶不同处理时间的桑黄菌丝为试材,采用0.1%秋水仙素诱变桑黄菌丝研究其诱变下桑黄菌丝再生菌株的生长速率以及多糖、黄酮和三萜等活性成分含量变化,以期获得生长快且活性成分含量高的菌种,以期为桑黄菌株选育、种质资源创新和应用奠定基础。结果表明:秋水仙素诱变后桑黄菌丝再生菌株的生长速率以及多糖、黄酮和三萜等活性成分含量基本呈增加趋势。其中,与对照相比,诱变酶解桑黄菌丝20 min获得的再生菌株20-1生长速率最快,增加了366.67%;三萜和多糖含量最高的再生菌株为10-5,分别增加了1069.73%和281.85%;多酚含量最高的再生菌株为5-1,增加了530.56%;黄酮含量最高的再生菌株为30-1,增加了3771.43%。  相似文献   

马铃薯原生质体培养体系改良   总被引：7，自引：1，他引：7  

周宇波  谢从华等 《华中农业大学学报》2001,20(5):469-473

试验以马铃薯试管苗叶片为原生质体来源，通过研究材料预处理方法对原生质体产量和质量的影响，培养方式及培养基中糖醇与细胞分裂的愈伤组织形成的关系，优化并建立了高效稳定的原生质体培养体系，获得了2个双单倍体系的叶肉原生质体再生植株。  相似文献   

高压电晕电场诱变野生草原黑蘑原生质体的初步研究     

马凤丽  李亚娇  刘超雄  孙国琴  马健波  王海燕  郭九峰 《蔬菜》2024,(5):44-50

摘要：为提高草原黑蘑菌丝体生长速度,采用高压电晕电场诱变技术处理草原黑蘑原生质体,通过设置4、5、6、7 kV的电压,分别进行30、60、90、120、150、180、210、240、270 s的处理,统计致死率,结合拮抗试验,初步筛选快速生长的新型突变菌株。结果显示,电压为6、7 kV时致死率均为100%,电压为4、5 kV时可获得原生质体再生菌落,致死率为8.45%～81.69%,其中4 kV处理150 s时致死率最高,为81.69%,是获得突变菌株的最佳致死条件;通过再生菌落的形态观察及拮抗试验,获得14株突变菌株,经生长量及生长速率的测量,发现诱变菌株生长后期4 kV的电压较5 kV更有利于促进菌丝体的生长量,在4 kV和5 kV处理条件下获得了生长速度较CK提高的11株正向突变菌株。高压电晕电场诱变技术 可为草原黑蘑菌种的新品种选育提供参考。  相似文献   

酸枣幼根原生质体的制备     

武延生  邢翠娟  李敏  武丽娜  牛伟涛  张鹏飞  王僧虎 《耕作与栽培》2021,41(1):25-27,31

以生长6～9 d的酸枣种子幼根为试验材料,0.7 mol·L-1甘露醇作为渗透压稳定剂、pH值5.5～6.0、28℃恒温水浴条件下,以光学显微镜观察的水解总时间、初始产生原生质体的时间、原生质体产量及细胞碎片量为指标,研究通过酶水解来制备酸枣幼根原生质体的方法.结果表明,在含1％果胶酶+4％纤维素酶R-10+3％纤维素...  相似文献   

无核柚新品种‘华柚2号’     

解凯东  方燕妮  伍小萌  谢宗周  邓秀新  郭文武 《园艺学报》2020,47(Z2):2945-2946

‘华柚2号’是将‘国庆1号’温州蜜柑愈伤组织原生质体与‘华柚1号’叶肉原生质体融合创制的二倍体雄性不育胞质杂种。树势中等,花瓣短而退化,雄蕊败育,雌蕊正常。果实扁圆形,隔离种植下完全无核,平均单果质量1 232.47 g,果皮中等厚,可食率57.03%。果肉粉红色,囊壁薄,果肉化渣多汁,风味浓,可溶性固形物12.37% ~ 13.33%,总酸0.90% ~ 1.20%,固酸比10.42 ~ 14.13,维生素C 24.26 mL • L-1。在湖北武汉地区种植,果实11—12月成熟,5年生嫁接树单株产量约50 kg。  相似文献   

Potential,constraints and applications of in vitro methods in improving grain legumes          下载免费PDF全文

Aditya Pratap  Umashanker Prajapati  Chandra Mohan Singh  Sanjeev Gupta  Meenal Rathore  Nupur Malviya  Rakhi Tomar  Ajeet Kumar Gupta  Swapnila Tripathi  Narendra Pratap Singh 《Plant Breeding》2018,137(3):235-249

Grain legumes, the important constituents of sustainability‐based cropping systems and energy‐limited vegetarian diets have long been the subject of scientific research. Tremendous technological strides were made in the so‐called orphan crops, in terms of both varietal improvement and generation of basic information. Despite recalcitrancy and high genotype dependency, in vitro culture techniques such as organogenesis, in vitro mutagenesis, embryo rescue and in vitro gene transfer have been deployed for improvement of several grain legumes and these played an important role in introgression of desirable genes from related and distant species and creation of additional genetic variability. Stable and reproducible regeneration protocols resulted in the development of genetically modified chickpea, pigeon pea, cowpea, mungbean, etc., while embryo rescue was deployed successfully for recovery of interspecific recombinants, a few of them exploited for the development of commercial cultivars. Nevertheless, doubled haploidy witnessed limited success and protoplast regeneration and in vitro mutagenesis remained of academic interest. The present review focuses on the progress, achievements, constraints and perspectives of using in vitro technology in grain legume improvement.  相似文献   

枇杷原生质体培养形成愈伤组织   总被引：4，自引：3，他引：4  

林顺权 《福建农林大学学报(自然科学版)》1991,(2)

把茂木、尾早生、解放钟、长红等枇杷品种的心脏形至完全成熟的胚,离体培养于分别附加一定浓度植物生长调节剂的B_5,MS和改良MS(大量元素减半,简称mMS)的培养基中,诱导产生胚性愈伤组织.这种愈伤组织在添加低浓度的2,4-D的mMS培养基上产生体细胞胚.以初代和继代培养若干代的愈伤组织作为分离原生质体的材料来源.酶解液的主要成分为纤维素酶、离析酶和崩溃酶,附加0.6 mol/L的山梨醇作为渗透压稳定剂,原生质体的最高得率为1.65±0.6×10~7/g.原生质体经液体浅层培养或半固体培养4—5d后,观察到第1次细胞分裂,2周后形成小细胞团.培养2个月后,获得了愈伤组织.  相似文献   

同源重组探针在暂时转化的烟草原生质体内的重组和缺失     

徐璧文  Paul F.Lurquin 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》1991,(3)

通过电激法(electroporation)将同源重组探针pBC 7导入烟草原生质体,再从转化的烟草原生质体中提取DNA,并将其转化到E.coli DH 1细胞.结果在E.codi DH 1细胞中获得了一种新的质粒分子,该质粒含有功能的neo基因,与重组探针pBC 7相比有较大的缺失、倒位,并出现了新的限制酶切部位,重组探针pBC 7的主要特征为含有Tn5的neo基因两个截短的不等部份,只有通过重排才可能产生完整的neo基因,这表明了暂时转化的原生质体在外源DNA整合以前具有这样的基因重排功能。  相似文献   

南昌霉素A产生菌原生质体诱变选育   总被引：1，自引：0，他引：1  

吴晓玉  涂国全 《江西农业大学学报》1999,(3)

南昌霉素 Ａ 产生菌———南昌链霉菌（ Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｎａｎｃｈａｎｇｅｎｓｉｓ） Ｎ Ａ Ｗ － ３ 菌株经原生质体再生及原生质体紫外线照射处理后,通过摇瓶发酵筛选出高产株 Ｎ Ａ Ｗ－ ３（１） ,其产南昌霉素 Ａ 能力由出发菌株 Ｎ Ａ Ｗ － ３ 的１ ３８３ 单位／ ｍ Ｌ,提高到１ ８９５ 单位／ｍ Ｌ,产素能力提高了３７ ％ 。  相似文献