鹿角炭角菌等三种真菌多糖对HIV-RT的作用   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘庆洪  罗倩怡  冯昆  王贺祥 《中国食用菌》2004,23(4):29-30

热水抽提和酒精沉淀的方法提取鹿角炭角菌、香栓菌、茶树菇的多糖复合物 ,在反应浓度为 1mg/mL时 ,三种多糖对HIV逆转录酶活性的抑制率分别为 (80 4± 1 2 ) %、 (90 6± 1 7) %和 (84 5± 2 1) %。  相似文献   

黑皮冬瓜LINE逆转座子RT序列的克隆与特征分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

赵芹  谢大森  江彪  何晓明  罗少波  李明珠 《热带作物学报》2015,36(3):466-473

根据LINE逆转座子逆转录酶保守序列设计简并引物,PCR扩增黑皮冬瓜"B98K"基因组DNA,获得580 bp左右目的条带。将PCR产物回收、克隆并测序,获得23条逆转酶序列,利用生物信息学软件分析其长度变异、碱基变化、相似性及系统进化关系。结果表明:这些序列长度在557~593 bp区间变异,同源比对核苷酸序列相似性为39.0%~99.3%,存在高度异质性,主要表现为缺失突变、移码突变与终止密码子突变,核苷酸序列聚类分析分为4个家族,家族1与家族2分别包含15和5个成员,占总序列数的65.22%和21.74%。对推导的氨基酸序列分析发现,第12位氨基酸残基处存在一保守的苯丙氨酸(Phe),多处位置存在半保守氨基酸残基;氨基酸序列相似性在20.0%~99.5%之间;其中8条序列可能具有转录活性,8条与15条序列分别发生移码与终止密码子突变。与已知物种构建系统发育进化树,发现冬瓜LINE逆转座子RT序列较保守,且与拟南芥、李、油菜等有较近的亲缘关系。研究结果为后续利用分子标记研究冬瓜种质遗传变异及基因组进化奠定基础。  相似文献   

在不同培养体系中犬原代软骨细胞及永生化软骨细胞的分子调控和表型转化     

Muhammad  Farooq  Rai  张云霞 《中国畜牧兽医》2010,(3):166-166

本研究旨在确定犬原代软骨细胞及永生化软骨细胞的生理特点和功能特点。通过引入人端粒酶逆转录酶的催化组分使软骨细胞永生化。原代软骨细胞失去它们的特征表型和生长特性,而永生化软骨细胞则以较快的生长速度保持多边形。原代软骨细胞中软骨细胞特异性标记的表达急剧减少,而软骨细胞非特异性基因的表达反而增多。单层细胞中永生化软骨细胞不表达软骨细胞特异性基因。原代软骨细胞和永生化软骨细胞均包封于海藻酸微球建立三维培养体系。原代软骨细胞和端粒酶转染细胞在藻酸盐培养物中均采用软骨细胞特异性基因表达类型。因此,端粒酶的表达可能代表软骨细胞无限制膨胀,且在三维培养体系中维持软骨细胞特异性表型。这些细胞为测试不同组织工程学在犬模型上的应用提供了标准化工具。  相似文献   

黄瓜属Ty1-copia类逆转座子逆转录酶序列的克隆及分析   总被引：7，自引：0，他引：7  

江彪  娄群峰  刁卫平  陈龙正  张万萍  陈劲枫 《园艺学报》2008,35(8):1147-1154

根据Ty1-copia类逆转座子逆转录酶的保守区设计简并引物,通过PCR扩增,从黄瓜属野生种酸黄瓜（Cucumis hystrix Chakr.）和栽培黄瓜（Cucumis sativus L.）中均扩增出260 bp左右的目标条带。扩增产物经纯化后克隆于pGEM-T Easy质粒载体,选择阳性克隆,再经菌落PCR鉴定,然后进行测序及序列分析。本文获得了21条来源于酸黄瓜和栽培黄瓜的逆转录酶序列,通过核苷酸聚类分为5个家族。这些核苷酸序列具有较高的异质性,主要表现为缺失突变,序列长度变化范围为255～272 bp,同源性范围为27.0%～98.1%。翻译成氨基酸后,有4条序列出现终止密码子突变,6条序列表现出移框突变。将这些逆转录酶的氨基酸序列与已登陆的不同物种同一类型逆转录酶的氨基酸序列进行聚类分析,表明它们可能有共同的起源。  相似文献   

辣椒Ty1-copia类逆转座子逆转录酶序列的克隆及分析     

刁卫平  王述彬  刘金兵  潘宝贵  戈伟 《分子植物育种》2012,(1):55-61

以辣椒属5个栽培种叶片为试材,利用Ty1-copia类逆转座子逆转录酶的保守序列设计简并引物,PCR扩增后均获得了260bp左右的目的条带。对C.annuum的扩增产物进行纯化、克隆和测序,经Mega4和DNAstar软件分析后,获得25条逆转录酶序列,核苷酸序列长度变化范围为225～272bp,这些序列存在高度的异质性,主要表现为缺失突变,同源性范围为23.1%～93.2%,核苷酸聚类分为7个组。翻译成氨基酸后,有9条序列存在1～3个不同程度的终止密码子突变,4条序列存在移框突变。将这25条逆转录酶的氨基酸序列与已发表的不同物种同一类型逆转座子的逆转酶序列进行聚类分析,表明辣椒的Ty1-copia型逆转座子与烟草、矮牵牛、马铃薯有很近的关系。  相似文献   

hTERT永生化山羊子宫内膜基质细胞系的建立及其致瘤性   总被引：1，自引：0，他引：1  

《中国兽医学报》2014,(12):1976-1981

为了检测转染人端粒酶逆转录酶催化亚单位(human telomerase reverse transcrip tase,hTERT)后建立的山羊永生化子宫内膜基质细胞(endometrium stromal cells,ESCs)是否存在潜在致瘤性。将hTERT导入2代山羊ESCs中建立永生化山羊ESCs(hTERT-ESCs),利用免疫细胞化学方法鉴定细胞并检测hTERT导入后细胞端粒酶活性的表达;分别取2代山羊ESCs和55代hTERT-ESCs,使用含不同浓度血清的培养液培养,利用MTT法检测其血清依赖性;软琼脂克隆形成试验检测hTERT-ESCs在半固体培养基中的克隆形成能力,同时测定hTERT-ESCs的生长曲线。结果显示:转染后获得的阳性克隆细胞及其传代细胞呈长梭形和三角形,与原代细胞形态一致,波形蛋白检测阳性,角蛋白检测阴性;免疫细胞化学方法显示hTERT阳性;hTERT-ESCs在含不同血清培养基中生长速度不同,具有血清依赖性;软琼脂克隆试验显示2代山羊ESCs和55代hTERT-ESCs均不能在软琼脂中生长;hTERTESCs具有正常体细胞生长曲线。证明hTERT-ESCs基本保持了正常山羊ESCs的生物学特性,不具有致瘤性。  相似文献   

慢病毒载体在制备转基因动物中的最新进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

谭碧君 《上海畜牧兽医通讯》2010,(1):18-19

慢病毒（Lentivirus）属于逆转录病毒科（Retrovidae），为RNA病毒，由于这类病毒的一个重要特点是毒粒中含有依赖RNA的多聚酶即逆转录酶，故现名为逆转录病毒。慢病毒载体（Lentivirus vectors）与简单的逆转录病毒载体相比，具有可感染分裂细胞及非分裂细胞，转移基因片段容量较大，目的基因表达时间长，不易诱发宿主免疫反应等优点，已成为当前制备转基因动物的载体之一。  相似文献   

永生化绵羊瘤胃成纤维细胞系的建立     

永生化绵羊瘤胃成纤维细胞系的建立 《畜牧与饲料科学》2021,42(3):1-6

[目的]建立永生化绵羊瘤胃成纤维细胞系,为基础研究和动物病毒的研究提供稳定的体外细胞模型。[方法]采用组织块贴壁法培养绵羊瘤胃成纤维细胞（ovine ruminal fibroblasts cells,ORFCs）,利用PEI试剂将带有hTERT基因的pCI-neo-hTERT质粒转染ORFCs,经G418筛选得到阳性克隆细胞。采用RT-PCR、Western Blot检测F₁₅和F₃₅代阳性克隆细胞的hTERT基因的转录和表达情况;利用血球计数法绘制原代ORFCs和F₃₅代阳性克隆细胞的生长曲线比较其增殖能力。[结果]将hTERT基因成功转入ORFCs并稳定表达;阳性克隆细胞的增殖能力显著高于原代ORFCs。[结论]该试验成功建立了永生化绵羊瘤胃成纤维细胞系。  相似文献   

Fibroblast growth factor receptor 3 effects on proliferation and telomerase activity in sheep growth plate chondrocytes     

Logan B Smith  Janelle M Belanger  Anita M Oberbauer 《畜牧与生物技术杂志(英文版)》2013,4(1):41-48

  相似文献   

梨反转录转座子逆转录酶序列预测及其进化和转录分析     

蒋爽  蔡丹英  滕元文 《园艺学报》2014,41(11):2196-2207

基于生物信息学方法对‘酥梨’基因组中不同类型的逆转录酶进行预测,共获得345条copia类和99条gypsy类逆转录酶。通过系统聚类,copia类逆转录酶可分为Ivana、Ale、TAR、Angela、Maximus和Bianca等6类;gypsy类逆转录酶可分为Athila、Tat、CRM、Reina和Tekay等5类。序列比对结果显示梨中逆转录酶具有较高的异质性,copia类逆转录酶序列分歧度为0.44,gypsy类为0.38。挑选出8类逆转录酶设计引物,并对梨属其它植物进行PCR扩增,结果显示这8类逆转录酶广泛存在于梨属植物中。在砂梨品种‘圆黄’的叶片、种子和果实中均发现该8类逆转录酶存在一定的转录水平,这是首次发现在梨属植物正常生长组织中逆转录酶发生转录。  相似文献