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【目的】 鉴定大豆根特异性启动子及其最小调控片段,并利用启动子工程技术构建时空特异人工启动子并评价其在根腐病抗性中的应用价值,为大豆抗疫霉根腐病的遗传改良提供遗传元件。【方法】 通过分析大豆根、茎和叶片转录组数据,筛选在根中特异高水平表达的基因,克隆获得其启动子序列。根据顺式元件的分布位置构建截短载体,并驱动GUS报告基因在大豆发状根组织中超表达,筛选控制根特异性表达的核心片段。将获得的核心启动子片段与疫霉菌诱导启动子元件p4XD串联构建人工启动子驱动疫霉抗性相关基因GmNDR1在大豆发状根中超表达,分析转基因组织对疫霉菌抗性水平及目的基因在病原菌侵染过程中的表达水平。利用转基因本氏烟草从整株水平评价转基因材料对疫霉菌的抗性水平。【结果】 通过筛选发现6个大豆根特异性表达的PR1同源基因,其中,pGmPR1-9具有最高的启动子表达活性。PLACE在线预测发现其启动子区域含有大量的根特异表达相关顺式元件。对pGmPR1-9启动子进行截短试验,发现5′端截短片段L1、L2、L3、L4和L5均具有启动GUS表达活性,长度为166 bp的L5（-166—-1）片段具有全长启动子80%的活性,并可驱动GUS在转基因烟草根中特异表达;3个3′端截短片段R1、R2、R3和1个双端截短片段M1几乎检测不到GUS酶活性。p4XD-L5融合片段驱动GmNDR1在大豆发状根中超表达后可显著提高大豆发状根对疫霉菌的抗性,超表达发状根接种病原菌后发病程度和病斑长度显著低于对照,疫霉菌丝积累量在接种48 h时减少66.5%。GmNDR1在超表达组织中始终维持在高表达水平,在接种前,表达量是对照组织的39.2倍,接种后,表达量受疫霉菌侵染诱导进一步上调,并在36 h达到最高。GmNDR1在p4XD-L5::NDR1转基因本氏烟草根中的表达量显著高于茎和叶片,表现出明显的根部表达偏好性。超表达株系接种辣椒疫霉菌15 d后的株高、根长和鲜重显著高于对照,同时叶片萎蔫率和病斑长度显著低于对照植株。【结论】 鉴定获得一个大豆根特异性表达启动子及其核心序列,融合诱导性和组织特异性启动子核心元件的人工启动子p4XD-L5驱动抗性基因GmNDR1超表达,可显著增强转基因大豆发状根和本氏烟草对疫霉菌的抗病性。 相似文献
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大豆根际细菌Ⅰ拮抗大豆根腐病菌研究 总被引：7，自引：1，他引：7
本研究从４１个土样中分离到大豆外根际细菌７２３株，根内细菌９４株。通过对病原菌Ｆ３，Ｗ１，Ｓ１的平板拮抗测定，得到拮抗菌２７９株对其中１５株根际细菌进行了温室防病试验，得到２株防病效果较好的菌株，其中ＢＨ１防病最高，对Ｆ３，Ｗ１，Ｓ２的防效分别为：６４。０％，６３．４％，３３．３％。 相似文献
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《Soil Science and Plant Nutrition》2013,59(2):234-243
Abstract Zinc (Zn) nutrition and plant genotype are two factors that may affect the tolerance of wheat to root-rot diseases. The aim of the present study was to determine the effect of Zn on shoot yield, root permeability and infection by Fusarium solani in six wheat genotypes with different Zn efficiency. A greenhouse (solution culture) experiment was carried out in which five bread wheat genotypes (Triticum aestivum L. cvs Rushan, Kavir, Cross, Pishtaz and Falat) and one durum wheat genotype (Triticum durum L. cv. Yav79), which are common in Zn-deficient soils of Iran and were exposed to two levels of Zn (0 and 1?μmol?L–1?Zn?kg?1, as ZnSO4.7H2O) and two F. solani infection levels (0 and 106?spore?mL?1). Zinc deficiency significantly decreased shoot dry matter in five of the genotypes (Yav79, Kavir, Rushan, Cross and Falat), but had no effect on shoot growth in Pishtaz. Infection with F. solani significantly decreased the shoot dry matter in Yav79, but did not affect the shoot dry weight of the other wheat genotypes. Root membrane permeability was lower in the Zn treatments than in the Zn-free treatments. Zinc deficiency caused a decrease in root reactive sulfhydryl (SH) groups, particularly in the Cross genotype. Root sulfhydryl groups decreased with Fusarium infection. Zinc application sharply increased the Zn content and decreased the Mn content of the shoots. Application of Zn had a positive effect on the tolerance of wheat to F. solani root rot. The relationship between Zn nutrition and disease tolerance suggests that Zn deficiency should be treated before evaluating the cost-effectiveness of fungicides. No correlation was found between the Zn efficiency of the wheat genotypes and Fusarium root-rot disease severity in this solution culture experiment. 相似文献
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于污水中分离的嗜酸柏拉红菌(Rhodoblastus acidophilus)在应用中发现对苎麻根腐线虫(咖啡短体线虫Pratylenchus coffiae和穿刺短体线虫P.penetrans)病有很好的防治效果.室内毒力测定表明:嗜酸柏拉红菌PSB-01发酵原液对咖啡短体线虫具有很强的毒杀作用,24h后死亡率达100%.发病麻园施用100倍PSB-01发酵液,60d后苎麻根内及根际周围土壤中的线虫减退率分别为93.8%和90.9%.田间试验表明,PSB-01菌剂不仅能有效防治苎麻根腐线虫病,对苎麻还有较大的增产效应,增产率达23.3%,明显优于对照药剂呋喃丹. 相似文献
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经鉴定笔柏(Sabina chinensis cv.Pyramidalis)根腐病病原为白纹羽菌(Rosellinia necatrix (Harting) Berlese=Dematophora necatrix Harting ),同时从该病菌上分离得一株寄生木霉,经鉴定为哈茨木霉(Trichoderma harzianum),它对白纹羽菌具强烈的拮抗和寄生作用.正交试验测得白纹羽菌丝生长最适温度25～28 ℃,最适pH 6.5;哈茨木霉生长最适温度28 ℃,在偏酸性条件下生长较好. 相似文献
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不同土壤消毒药剂对甘薯2种土传病害的防治效果 总被引：1，自引：0，他引：1
为寻找能同时防治甘薯根腐病和茎线虫病的高效药剂,选择98%棉隆微粒剂等5种土壤消毒药剂,研究其对2种病害的防治效果及对甘薯产量的影响。结果表明,98%棉隆微粒剂对根腐病的防治效果最好,可达46.23%;其他药剂的防效为-5.92%~29.08%。土病消可湿性粉剂对茎线虫病的防治效果最好,可达87.79%;其他药剂处理的病薯率和病情指数与土病消可湿性粉剂处理差异不显著,防效为56.67%~80.35%。收获期测产表明,98%棉隆微粒剂对甘薯的增产效果最好,产量为23 491.80 kg/hm2,较空白对照增产35.33%;其他药剂处理较对照增产-31.59%~20.77%。建议生产上选择98%棉隆微粒剂,于甘薯定植前施用,以降低根腐病和茎线虫病对甘薯产量的影响。 相似文献
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芦荟根腐病病原菌的鉴定 总被引：8，自引：0，他引：8
芦荟是百合科多年生常绿多肉质草本植物，原产于非洲热带沙漠干旱地区，是一种古老而神奇的植物。随着芦荟的医疗、保健作用逐渐被人们所认可，70年代以来，美国、日本、韩国等国家相继掀起了”芦荟热”。我国芦荟产业从80年代末开始起步，近几年来全国31个省市自治区除西藏外均有栽培，尤以海南、云南、福建和广东省等地较为集中。据不完全统计，全国芦荟种植面积为800km^2左右。但是随着芦荟大规模的种植，其根腐病的发生也日愈严重，威胁到芦荟种植业的发展。2004年，大面积田间抽样调查结果显示，该病在云南省的发病率为42．54％、死亡率为26．36％。对于芦荟根腐病病原菌的研究，国内外还没有报道，本文对引起云南省芦荟根腐病的病原菌进行了系统的鉴定。 相似文献
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新疆甜菜根腐病病原种群鉴定 总被引：4，自引：2，他引：4
从新疆各主要甜菜产区采集669个甜菜根腐病样,共分离出735个分离物,其中真菌分离物715个,细菌分离物20个,说明真菌是主要的病原种群。真菌中镰刀菌501个,占分离物总数的68.2%;丝核菌113个,占15.4%;腐霉菌81个,占分离物总数11.0%。经鉴定,有6种镰刀菌,即尖孢镰刀菌(F.oxysporum)、串珠镰刀菌(F.moniliforme)、茄病镰刀菌(F.solani)、木贼镰刀菌(F.equiseti)、砖红镰刀菌(F.lateritium)、禾谷镰刀菌(F.graminearum);3种腐霉菌,即瓜果腐霉(Pythiumaphanidermatum)、简囊腐霉(P.monospermum)和P.spp;丝核菌主要为立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani),AG-2和AG-4融合群,分别占丝核菌总数的50.4%和35.4%。用上述代表菌进行致病性测定,均可引起甜菜根部腐烂、维管束变色等典型根腐症状。 相似文献