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3.
为探讨不同保存方法对武汉单极虫Thelohanellus wuhanensis DNA提取和PCR扩增的影响,将从患武汉单极虫病的异育银鲫Carassius auratus gibelio鱼苗上分离出含有孢子的孢囊,分别置于100%乙醇、70%乙醇、2.5%戊二醛、10%福尔马林、Bouin's液、Carnoy's液和Müller's液中保存50 d,经计数调整孢子等量后分别进行DNA提取、常规PCR和巢式PCR扩增。结果表明:100%乙醇和70%乙醇保存方法对武汉单极虫孢子DNA提取、常规PCR和巢式PCR扩增均无任何影响,等同于新鲜孢子,可作为孢子的保存方法;2.5%戊二醛和Bouin's液保存方法只对孢子DNA提取有影响,但均能在常规PCR和巢式PCR扩增后出现特异电泳条带,可作为用于常规PCR和巢式PCR扩增的孢子保存方法;10%福尔马林和Müller's液保存方法对孢子DNA提取和常规PCR扩增均有影响,但均能在巢式PCR扩增后出现特异电泳条带,故只能作为用于巢式PCR扩增的孢子保存方法;Carnoy's液保存方法无论在孢子DNA提取还是进行常规PCR和巢式PCR扩增均无阳性结果,故不能用作孢子核酸分子生物学研究的保存方法。研究表明,除100%乙醇和70%乙醇保存方法外,其他保存方法对孢子DNA提取、常规PCR和巢式PCR扩增均有不同程度的影响。 相似文献
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鲤鱼单极虫病组织病理研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文报道了1989年以来,造成王快水库等网箱养鲤大批死亡的单极虫病,病鱼出现烂鳃、肛门红肿、腹部膨大,腹腔内有大量粘液等症状;显微观察的结果为:各组织器官发生病变,肠上皮细胞严重坏死,平滑肌纤维发生玻璃样变及解体,鳃丝充血,鳃小片融合,肝细胞核溶解、坏死。 相似文献
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武汉单极虫巢式聚合酶链反应检测方法的建立与优化 总被引:2,自引:1,他引:1
应用巢式聚合酶链反应(nested PCR)建立了一种检测异育银鲫武汉单极虫(Thelohanellus wuhanensis)基因组DNA的方法,提取的DNA作为模板进行两次扩增,第一次扩增用单极虫18S rRNA序列通用引物:5'-CTGCGGACGGCTCAG TAAATCAGT-3'和5'-CCAGGACATCTTAGGGCATCACAGA-3',扩增长度为1 584 bp;第二次依据第一次扩增产物中武汉单极虫特有的高度保守区设计特异性引物:5'-ACCCACTTCTGTGGC CTTTC-3'和5'-AATCCGACCTACAACGCTGG-3',扩增长度为853 bp。结果表明,通过PCR反应体系中退火温度、dNTP、Mg2+、延伸时间、扩增循环数和模板浓度的优化,优化后的巢式PCR最低DNA检测量达10 fg,优化后比常规PCR检测的灵敏度高104倍。因此,本文所建立的巢式PCR检测方法适合于水环境或水生动物中武汉单极虫的微量检测,也为异育银鲫武汉单极虫病的诊断和流行病调查提供了一种高灵敏的检测技术。 相似文献
7.
阿城主要旅游区空气负离子水平与评价研究 总被引:1,自引:0,他引:1
Wang Kun Yuan Wei Lin Xiao-ying 《农业科技与信息》2007,(10)
本文以哈尔滨市阿城区两个主要的旅游区—横头山原始森林公园、平山风景区和市区内的繁华街道为研究地点,采用DLY—3F型森林大气离子浓度测量仪进行了景区和市区的空气负离子水平的日变化规律的对比研究,然后用单极系数和安倍空气离子评议系数对上述研究地点作空气质量评价。得到如下结论:不论是单位体积的空气中负离子含量,还是单极系数q值和空气离子评议系数CI都表明阿城主要旅游区空气质量明显优于哈尔滨市区,且上午的空气质量要高于下午,有利于旅游活动的开展。 相似文献
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在湖南省邵阳地区水产研究所饲养亲鲤的池塘中,发现散鳞镜鲤亲鱼被一种单报虫大量侵袭引起发病、死亡,使养鱼生产遭受损失,为了探索鱼病原因及其病理变化,寻找有效的防治方法,对此病进行了研究。 相似文献