基于qPCR和LAMP技术的马铃薯晚疫病菌快速检测方法     

祝菊澧  梁静思  张佩  王伟伟  林桐司骐  谢欣娱  苏瑞  唐唯 《作物杂志》2019,35(6):168-3311

马铃薯晚疫病菌（Phytophthora infestans）能侵染多种茄科植物,它引起的马铃薯晚疫病,是马铃薯生产中的第一大病害。为了开发能在田间快速检测马铃薯晚疫病病原的方法,利用P. infestans T30-4基因组测序数据的contig 1.18131,设计qPCR和LAMP引物,优化扩增条件后得到引物的特异性和灵敏度,最后通过检测田间收获薯块,比较形态学传统方法、qPCR及LAMP的差异。特异性检测结果发现,qPCR和LAMP仅在含有P. infestans DNA模板的体系有阳性扩增,在寄主和其他微生物DNA中均无扩增;在优化的条件下,qPCR和LAMP的检测下限可达1×10 ^-6ng/μL,在有寄主和其他微生物DNA存在的条件下,引物的灵敏度没有显著差异。利用两种快速方法对在大理、丽江及昆明3个地区田间收获薯块上检测发现,qPCR和LAMP方法得到的检出率差异极为不显著（P=0.420）,两种快速检测方法和形态学鉴定方法检出率差异极显著（P=0.009）。在大理、丽江及昆明3个地区的薯块中,两种分子检测方法检出率均比形态学方法高。其中,qPCR检测方法比形态学方法分别提高了12.00%、2.00%、8.70%;LAMP检测方法比形态学方法分别提高了11.30%、2.00%、8.70%。  相似文献   

某有色金属尾矿及其污染土壤的原位风险管控处置     

周曼  熊邦  李雯婕  陈杭洲 《绿色科技》2021,(4)

为降低某尾矿堆对周边土壤和地下水环境造成的重金属污染风险,对该尾矿堆河堆场之下的污染土壤进行了原位封闭阻隔处置。综合考虑尾矿堆的安全稳定性、环境污染现状、水利防洪等因素,提出了采取阻隔屏障、临空面支护隔离及防渗膜+黏土+种植植物覆盖等一系列风险防控措施,从而达到污染源头削减与生态恢复协调控制效果,为尾矿和污染土壤的环境原位风险防控工作起到积极的示范意义。  相似文献   

堤防勘察中应注意的几个问题     

孙超郝国占  贾红军 《畜牧市场》2001,(9):35-36

文中对堤防勘察的特点进行了分析，并对堤防勘察实践中遇到的实际问题提出了一些想法和建议。  相似文献   

简便快速的胚胎性别鉴定方法-LAMP法   总被引：13，自引：0，他引：13  

王海浪  薛建华  孙凤俊 《黑龙江动物繁殖》2003,11(4):38-39

胚胎性别鉴定技术是家畜胚胎生物工程新技术,也是人为控制家畜后代性别的重要途径。胚胎性别鉴定技术的研究已有几十年的历史,前期的研究主要采用非分子生物学方法,如细胞学方法、免疫学方法、X-相关酶法等。20世纪80年代末随着DNA体外重组技  相似文献   

Cultivar, Nitrogen and Irrigation Influence on Grain Quality and ItsForecasting Methods by In situ Reflected Spectrum of Winter Wheat     

《中国农业科学(英文版)》2004,3(11):831-841

  相似文献   

用含有凝胶的基质进行等电点聚焦电泳分离和检测蛋白酶     

Yamau.  Y 朱克寅 《农业新技术新方法译丛》1996,(2):1-2

介绍用等电点聚焦电泳分离并检测蛋白酶的一种精确方法。向含有明胶铁聚丙烯酰胺凝胶中加入０．３％辛基－Ｄ－吡喃葡糖苷或８Ｍ尿素，同时向样品溶液中加入细胞色素Ｃ和ＰＩ标记蛋白，这样可避免电泳过程中蛋白酶与基质的互作。在木瓜蛋白酶，胰凝乳蛋白酶和蛋白酶Ｋ等常用蛋白酶的估计等电点进行检测，检测极限可达微微克至毫微克。  相似文献   

广西野生稻种质资源原位保护示范区     

《广西农业科学》2005,36(3):F002-F002

2002年9月，广西农科院水稻所野生稻种质资源研究室主任陈成斌领导的课题组实施“野生稻资源调查”国家课题，在玉林市重发现国内罕见、连片分布、面积最大的野生稻原生地，引发了新闻媒体的广泛报道，也引起了国家相关部委的重视并派员前来视察。经科学论证和积极申报，国家农业部批准“广西野生稻种质资源原位保护示范区”作为国家重点项目立项、资助，  相似文献   

蔬菜作物原位转基因技术研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

孟成民  曹必好  刘娟旭  雷建军 《中国蔬菜》2005,1(12):45-47

本文介绍了基因原位转化方法的产生与发展,原位转化的机理以及影响原位转化技术的各种因素;并对原位转基因技术在蔬菜中的应用现状、前景和存在问题进行了综述。  相似文献   

西瓜生殖细胞原位转化技术研究初报   总被引：1，自引：0，他引：1  

王果萍  孙毅等 《中国西瓜甜瓜》2002,(1):23-25

利用西瓜有性生殖过程，将常规提纯的质粒DNA稀释后，涂抹在授粉后的柱头上，使其随花粉管伸入胚珠过程中形成的通道进入到生殖细胞，形成的合子胚在适宜的发育条件下，在植株原位发育成熟，从而得到转化种子。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征RT-LAMP检测方法的建立和初步应用     

孙凤萍  高骏  刘成倩  李红  易建中  姚惠娟 《上海畜牧兽医通讯》2018,(1):2-5

根据Genbank上已报道的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因组序列设计了2对LAMP引物(P-F3/P-B3、P-FIP/P-BIP),通过反转录-环介导等温扩增技术(RT-LAMP)反应条件的优化,建立了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)RT-LAMP检测方法,并通过酶切的方法对阳性结果进行了验证。本方法最低可以检测到反应体系内1pg的PRRSV的RNA,表明本方法具有较高的检测灵敏度;通过在反应中加入SYBR-Green I荧光染料后可以方便地用肉眼对试验结果进行可视化判定。所以,本研究建立的PRRSV的RT-LAMP检测方法能够满足基层临床PRRSV病原的快速检测要求。  相似文献