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1.
2.
《中国兽医学报》2017,(4)
基因工程鲎素体外抑菌活性良好,为进一步评价其在体内抑菌活性和治疗效果,本研究建立了金黄色葡萄球菌小鼠肺部和腹腔感染模型,探讨了基因工程鲎素对2种感染模型小鼠的治疗效果。比较基因工程鲎素治疗前后,不同模型小鼠的存活率、血液以及组织中的细菌载量变化;比较治疗前后小鼠肺部感染动物模型的病理学变化。结果表明,与对照组相比,基因工程鲎素治疗后肺部感染模型小鼠存活率升高40%,腹腔感染模型小鼠存活率升高60%,治疗后腹腔感染小鼠血液中的细菌载量下降10~4倍;病理学分析结果表明,基因工程鲎素治疗后小鼠肺脏的炎症反应较轻,肺部组织结构被破坏程度较轻。综上所述基因工程鲎素对金黄色葡萄球菌感染小鼠的体内治疗效果明显,显著提高了小鼠存活率,抑制了细菌的扩散,减轻了病理炎症变化,初步表明基因工程鲎素具有良好的抗感染药物研发前景。 相似文献
3.
鲎C因子是鲎血细胞中一种对内毒素具有高亲和力的丝氨酸蛋白酶原,可替代鲎试剂用于内毒素检测。鲎C因子N端Cys—EGF.sushil—sushi2(CES)片段中的sushil区域是与内毒素结合的关键部位。本研究在sushil结构域中的特定位点断开CES与内毒素结合的功能片段,然后分别和蛋白质内含肽SspDnaX的N端片段(IN)和C端片段0C)连接,并在大肠杆菌中表达,表达产物经亲和层析纯化、复性以及内毒素去除后,利用蛋白质反式剪接系统,在体外诱导该蛋白质内含肽发生剪接,重新得到C因子的CES蛋白,并检测其活性。实验结果表明此重组CES蛋白具有结合内毒素活性,提示在大肠杆菌系统中开发低成本内毒素检测试剂的可行性。 相似文献
4.
5.
应用鲎试剂动态浊度法,将硫酸链霉素制备成4、2、1、0.5mg/mL溶液,定量添加标准内毒素进行干扰预试验,计算回收率,确定不干扰浓度为0.5—2mg/mL。从中选出1mg/mL为最佳浓度,然后进行3个批次硫酸链霉素正式干扰试验。在供试品中定量添加标准内毒素,其回收率分别为125.8%、126.1%、127.3%,均在50%-200%之间,说明此浓度的供试品对鲎试剂反应无干扰作用。因此,内毒素含量在0.015—1EU/mL范围内,将硫酸链霉素制备成浓度为1.0mg/mL的溶液,可用于细菌内毒素的定量检测。 相似文献
6.
中国鲎(Tachypleus tridentatus)基因工程抗菌肽的制备及其抗菌活性 总被引:3,自引:0,他引:3
从中国鲎血细胞RT-PCR扩增抗菌肽tachyplesins基因,经改造构建原核和真核表达载体pET-KRN、pPIC9-KRY,并分别在大肠杆菌DE3和毕赤酵母GSll5中诱导表达.用Tris-Tricine SDS-PAGE检测并进一步电洗脱纯化表达产物,经体外生物活性测定表明,表达产物KRN对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、伤寒沙门菌的抑菌环为25、22、25、16mm;MIC值为3.57、7.14、3.57、14.28mg/L.表达产物KRY对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、伤寒沙门菌和李氏杆菌的抑菌环为26、22、25、18、16mm;MIC值为1.57、3.14、1.57、6.28、6.28mg/L,对水霉的抑菌效果尤其显著,抑菌环达35mm. 相似文献
7.
8.
9.
将猪亚利桑那菌培养后离心、冷冻,以小白鼠为试验动物进行细菌毒素鉴定,结果确定猪亚利桑那菌仅有内毒素;用鲎试剂测得其细菌内毒素含量大约为0.125 EU/mL。取10只健康小白鼠观察猪亚利桑那菌对动物的致病性。小白鼠临床症状明显,眼内有脓性分泌物;病理组织切片结果发现,肝细胞界限不清,胞核大小差异较大;脾脏内有大面积出血区;肾小管上皮细胞肿胀,部分胞核消失;心肌纤维肿胀、断裂;由此可见猪亚利桑那菌对小白鼠有很强的致病性。 相似文献
10.