巨型艾美耳球虫偏菱形样蛋白EmRP免疫原性分析     

靖传旭  杨新朝  徐立新  严若峰  李祥瑞  宋小凯 《畜牧与兽医》2020,(4):122-126

在前期研究中,从巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)cDNA文库中筛选到了免疫保护性抗原偏菱形样蛋白EmRP,本研究为揭示该抗原的免疫保护机理,进一步检测了其免疫原性。以E.maxima卵囊cDNA为模板,用RT-PCR技术扩增EmRP,并构建真核表达质粒pVAX1-EmRP,将其经腿部肌肉注射2周龄的雏鸡,3周龄加强免疫。分别于首次免疫后和加强免疫后1周,采集血清,用ELISA方法检测血清特异性IgG水平,用荧光定量PCR方法(qPCR)检测细胞因子水平,用流式细胞术检测CD4^+T淋巴细胞和CD8^+T淋巴细胞的比例,分析EmRP诱导的免疫反应。序列分析表明,EmRP含有偏菱形样蛋白超家族成员保守区域,为非跨膜蛋白,分子量约为28.4 kD。真核表达质粒pVAX1-EmRP免疫鸡后,与对照组相比,鸡体IFN-γ、IL-2、IL-10和IL-17等细胞因子转录水平显著提升;CD8^+和CD4^+ T细胞比例显著提高,而血清特异性IgG水平与对照组差异不显著。结果表明,EmRP诱导的免疫保护作用主要是由其诱导的细胞免疫反应实现的,可以作为研制E.maxima新型疫苗的候选抗原。  相似文献   

鸡巨型艾美耳球虫卵囊呼吸作用的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

朱经发  陈淑玉 《畜牧兽医学报》1993,24(3):265-269

采用纯种巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)卵囊,人工感染3周龄的石歧杂雏鸡,及时收集卵囊,以0.1N硫酸溶液悬浮,用微量呼吸检压仪检测卵囊呼吸作用。试验表明:孢子化过程中最初十小时内该球虫卵囊的耗氧量为3.59μl/小时/10~6个卵囊。耗氧量的变化与其细胞分裂过程相对应,耗氧量在三次核分裂前夕降低,但在分裂期升高。最高耗氧量出现于子孢子形成期,达18.91μl/小时/10~6卵囊。孢子化后卵囊的呼吸作用较缓慢,耗氧量为0.85μl/小时/10~6个卵囊。完成孢子化所需时间为26小时。  相似文献   

Evaluation of three phytoplankton species as food for the pearl oyster <Emphasis Type="Italic">Pinctada fucata</Emphasis>     

Tomoki Hashimoto  Katsuya Hyodoh  Takuma Hirose  Satoshi Nishikawa  Toshiya Katano  Shin-ichi Nakano 《Aquaculture International》2008,16(4):309-318

In the pearl cultivation farms of the Ehime Prefecture, Japan, mass mortalities of the pearl oyster Pinctada fucata have occurred since 1994. The occurrences of mass mortality roughly coincided with a shift of the dominant phytoplankton from Skeletonema and Chaetoceros to Chaetoceros and Nitzschia all of which belong to Bacillariophyceae. Hence, we evaluated Nitzschia, together with Chaetoceros and Isocrysis, as food for the oyster. Wet weights, lengths, widths, glycogen contents, and growth rates in terms of wet weight of the oysters in all the feeding treatments were significantly higher than those in the non-feeding treatment. The highest glycogen content (2.34%) and growth rate (2.21 g month⁻¹) were found in the Chaetoceros treatment. Growth rate in the Isocrysis treatment (1.63 g month⁻¹) was also high, although glycogen content in this treatment (0.41%) was low. In the Nitzschia treatment, growth rate of the oyster (0.94 g month⁻¹) was the lowest and glycogen content (0.83%) was also low relative to that in the Chaetoceros treatment. Chlorophyll a concentration in fecal pellets was lowest in the Nitzschia treatment (<2.7 μg mg⁻¹), suggesting more complete digestion of Nitzschia by the oyster. Thus, Nitzschia was edible and digestible but not assimilated by P. fucata. We propose the following scenario for the relationship between Nitzschia dominance and mass mortality. When Nitzschia dominates in a culture area, the physiological condition of P. fucata deteriorates due to low assimilation of Nitzschia by the oyster, followed by susceptibility of the oyster to infection by agents lethal to the oyster.  相似文献   

马氏珠母贝蛋白的分离及分子量分布研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

郑惠娜  章超桦  刘书成  曹文红 《水产科学》2008,27(9)

试验结果表明,马氏珠母贝全脏器各分离蛋白组分占总蛋白含量分别为:非蛋白氮1.48%,肌浆蛋白33.20%,肌原纤维蛋白13.14%,碱溶性蛋白21.54%,基质蛋白30.65%;贝肌肉各分离蛋白组分占总蛋白含量分别为:非蛋白氮0.83%,肌浆蛋白26.56%,肌原纤维蛋白18.48%,碱溶性蛋白30.34%,基质蛋白23.79%;马氏珠母贝蛋白氨基酸组成均衡,呈味氨基酸及支链氨基酸含量高,但在各蛋白组分中的含量存在一定差异性.利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定的分子量分布结果显示,2种原料蛋白的肌浆蛋白分子量分布范围较宽,集中在200～19 kDa,肌原纤维蛋白分子量分布集中在200～45 kDa,碱溶性蛋白集中分布在41～3 kDa.  相似文献   

马氏珠母贝IGF2BP1基因的鉴定及对矿化相关基因表达的影响     

熊盼盼  张华  何毛贤 《水产学报》2022,46(12):2265-2273

胰岛素样生长因子2结合蛋白( IGF2BPs)是一种重要的RNA代谢调控因子,涉及多个不同的生物学过程。本研究鉴定了一个马氏珠母贝IGF2BP1基因,命名为PfIGF2BP1-1,该基因cDNA全长为7348 bp,ORF长 1818 bp,编码605个氨基酸。多序列比对和系统进化分析表明,PfIGF2BP1-1有2个RRM结构域和4个KH结构域,与其他物种来源的IGF2BPs同源。实时荧光定量PCR结果显示,PfIGF2BP1-1 在马氏珠母贝的8个组织中均有表达,在肌肉组织表达最高,其次为足和外套膜组织。利用pET-32a 原核表达载体构建了含有PfIGF2BP1-1成熟多肽区的重组质粒并成功表达蛋白。在IPTG浓度为0.5 mmol/L,37 ℃培养8 h的条件下诱导表达PfIGF2BP1-1蛋白最佳。PfIGF2BP1-1蛋白刺激马氏珠母贝外套膜原代细胞,引起壳基质蛋白基因Accbp、MSI7、Nacrein的表达水平显著上升(p < 0.05),表明PfIGF2BP1-1蛋白可诱导壳矿化相关基因的表达参与马氏珠母贝的生物矿化过程。  相似文献   

企鹅珍珠贝和马氏珠母贝软体部脂肪酸组成     

方富永  黄甫  邓陈茂  张强  黄海立 《水产科学》2007,26(7):384-386

对企鹅珍珠贝和马氏珠母贝软体部脂肪进行了提取和测定。结果表明,企鹅珍珠贝和马氏珠母贝软体部脂肪含量分别为8.3%和9.6%。企鹅珍珠贝脂肪酸中DHA EPA的总含量为39.71%,比马氏珠母贝脂肪酸中DHA EPA的总含量(30.86%)高。2种珍珠贝软体部脂肪酸均具有重要的开发利用价值。  相似文献   

马氏珠母贝大亚湾和三亚野生种群内自繁及种群间杂交一代的RAPD分析   总被引：9，自引：1，他引：9  

王爱民  丁小雷  邓凤姣  叶力  阎冰 《海洋水产研究》2003,24(4):19-25

运用RAPD技术分析了广东大亚湾野生种群内繁殖一代DDl群体和海南三亚野生种群内繁殖一代SSl、两野生种群间杂交一代DS1群体各18个个体的遗传多样性。筛选的28个含10碱基的随机引物中，其中11个随机引物可产生稳定和可重复的多态扩增结果，共检测出86个位点，其中DDl群体有74个基因位点，其中56个表现多态，多态比例为75．68％；SSl群体79个基因位点，其中57个表现多态，多态比例是72．15％；DSl群体有72个基因位点，其中64个表现多态，多态比例为88．89％。用修正的Shannon表型多态性指数量化3个群体的遗传多态性，DDl、SSl和DS13个群体的遗传多态性分别为0．2280，0．2ll5和0．2456。不同地理种群间杂交能够增加子代的遗传多态性。  相似文献   

马氏珠母贝不同地理种群内自繁和种群间杂交子一代主要性状的比较   总被引：28，自引：1，他引：28       下载免费PDF全文

王爱民 《水产学报》2003,27(3):200-206

为了培育马氏珠母贝新品种，开展了不同地理种群内自繁和种群间杂交的工作，获得了3个自繁群体和3个杂交群体，BB1、DD1和SS1分别来自北海野生种群(BW)、大亚湾野生种群(DW)和三亚野生种群(SW)自繁一代；BDl、BS1和DSl分别来自BW与DW、BW与SW以及DW与SW杂交一代。运用方差分析对6个子一代群体的5个主要性状(壳长、壳宽、壳厚、总体重和壳重)进行了比较，3个杂交群体未表现出杂种优势。但获得的6个群体将成为进一步选育的基本群体。子一代的变异性增加为进一步选育奠定了基础。  相似文献   

大杯伞柄多糖与菌丝体粗多糖的免疫识别方法初探     

郑恒光  陈君琛  汤葆莎  吴俐  翁敏劼  高慧颖 《食用菌学报》2014,(3)

采用热水(80℃)提取和75%乙醇沉淀、Sepharose CL-4B凝胶过滤及DEAE Sepharose CL-4B阴离子交换等方法分离纯化大杯伞(Clitocybe maxima)柄粗多糖,获得伞柄多糖纯品,制备多糖抗体;采用热水法提取大杯伞菌丝体粗多糖。用碳二亚胺法将纯化伞柄多糖与牛血清白蛋白进行共价化学偶联,并将偶联产物(拟糖蛋白)免疫兔子以制备抗血清,以酶联免疫法检测抗体滴度。依据该抗体与来自相同菌株的菌丝体粗多糖免疫反应差异对这两种多糖进行免疫识别,结果表明:经过亲和层析纯化后,第六次免疫抗血清对伞柄多糖的抗体滴度可达64K,而且对菌丝体粗多糖反应呈阴性,显示该抗体可识别这两种多糖之间的结构差异。  相似文献   

Variation in clearance and ingestion rates by larvae of the black-lip pearl oyster (Pinctada margaritifera, L.) feeding on various microalgae   总被引：1，自引：0，他引：1  

M.S. Doroudi  P.C. Southgate  & J.S. Lucas 《Aquaculture Nutrition》2003,9(1):11-16

Clearance rate (CR) and ingestion rate (IR) of different sizes (89, 125 and 188 μm shell length) of Pinctada margaritifera larvae were determined when feeding on various microalgae. The microalgae tested were the diatoms, Chaetoceros muelleri and C. simplex, and flagellates, Tahitian Isochrysis aff. galbana, Pavlova lutheri and P. salina at 5 or 10 cells μL^–1. Both CR and IR of microalgae tested in this study increased with increasing larval size; but at all larval sizes, diatoms resulted in lower CR and IR. Of the microalgae tested, P. margaritifera larvae showed greatest CR and IR with the two Pavlova spp. Maximum CR for P. salina was 10.5, 21.2 and 29.7 μL h^–1 for larvae with shell lengths of 89, 125 and 188 μm, respectively. The highest IR values for P. margaritifera larvae with shell lengths of 89, 125 and 188 μm were 8.7, 81.0 and 165.7 cells·larva^–1 h^–1, respectively. CR and IR of P. salina were approximately five times higher than those recorded for C. muelleri and C. simplex.  相似文献