大鼠心肌条件培养基对ICR小鼠胚胎干细胞分离克隆的影响     

薛亚梅  王锋 《畜牧兽医学报》2005,36(5):440-445

采用大鼠心肌条件培养基(RH CM)培养ICR小鼠的桑椹胚和囊胚,发现由囊胚分离的ES细胞传代后ES集落的出现率显著高于桑椹胚(P<0.05),囊胚更适合作为ES细胞分离克隆的材料。以RH CM为培养基的试验组ES细胞传代的平均时间间隔为38 h,对照组传代的时间间隔平均为78 h,两者差异显著(P<0.05)。表明RH CM能够促进ES细胞贴壁增殖和ES集落的形成,有效地维持ES细胞未分化状态。试验中设计的3 种培养条件对原代ES集落的形成影响不显著,但对传代后的ES集落的形成和传代的代次有显著差异。其中以MEF作饲养层,添加RH CM培养基的效果最好。  相似文献   

兔胚胎的一些与分离胚胎干细胞有关的生物学特征   总被引：6，自引：1，他引：5  

赖良学  郑瑞珍 《中国兽医学报》1998,18(4):351-354

为获得具有发育全能性的胚胎干细胞（ＥＳ细胞），对３日龄、３．５日龄和４日龄家兔胚胎的形态结构和免疫组化特征进行了观察。家兔胚胎的外围，不仅有透明带，还包有一层很厚的胶膜。３日龄兔胚为桑椹胚；３．５日龄胚胎已出现囊胚腔，囊胚腔较小，扩增内细胞团（ＩＣＭ）占据囊腔的１／２～２／３；４日龄为囊胚，囊腔扩大，ＩＣＭ与囊胚腔的体积比值缩小。桑椹胚的卵裂球和３．５日龄、４日龄胚胎的ＩＣＭ，以碱性磷酸酶染色和胚胎阶段特异性细胞表面抗原－１（ＳＳＥＡ－１）免疫荧光标记均呈强阳性，说明它们是由未分化的细胞构成。因此，从保证全能性的角度考虑，３日龄、３．５日龄和４日龄的家兔胚胎，均可用于ＥＳ细胞的分离。  相似文献   

家畜胚胎干细胞的分离培养和鉴定     

栾黎明  李世杰  杨增明 《中国畜牧杂志》2003,39(2):48-50

家畜胚胎干细胞的分离培养和鉴定工作对于研究和利用家畜胚胎干细胞具有重大意义。本文对文献中报道的各种分离、培养和鉴定方法进行了综述 ,并介绍了几种主要家畜的胚胎干细胞在近十余年间的研究进展情况。  相似文献   

由体外受精囊胚获得ICR小鼠ES细胞   总被引：2，自引：0，他引：2  

时伟红  安志兴  董婉维  秦英  王碌增  王太一 《动物医学进展》2002,23(4):97-99

收集鼠卵母细胞和精子，采用体外受精技术，获得早期胚胎。体外培养胚胎至囊胚，分离内细胞团，获得ICR小鼠的ES细胞。结果不但获得了来自体外受精囊胚的ICR小鼠ES细胞，而且表明用体外受精方法获得的小鼠早期胚胎的数量明显大于常规方法，且比较稳定。ICR小鼠ES细胞的获得，为研究小鼠的ES细胞分化提供了条件。  相似文献   

小鼠胚胎干细胞体外定向诱导分化成骨细胞   总被引：3，自引：0，他引：3  

宋晓平  窦忠英  雷安民  华进联  冯秀亮  屈雷 《农业生物技术学报》2006,14(1):7-10,i0001

将小鼠5d龄ES-D3细胞源的类胚体(EBs)单细胞,按5×104/mL接种6孔细胞培养板,在DMEM基础培养基中使EBs单细胞贴壁培养。于第14!21天时,分别添加60%成骨细胞条件培养液(A组)、50μg/mL维生素C"50mmol/Lβ-磷酸甘油(B组)和50μg/mL维生素C"50mmol/Lβ-磷酸甘油"1μmol/L地塞米松(C组),并设不添加诱导剂对照组(D组)。第22天时用1%茜素红染色显示阳性细胞,计算成骨细胞诱导形成率,数据用方差分析和多重比较检验。结果表明,A组细胞增殖呈团状聚集,茜素红染色阳性细胞结节多分布于聚集的细胞群内及其边缘,成骨细胞诱导形成率为10.04%,与对照组比较,差异极显著(P<0.01);B组诱导分化的细胞分泌物形成网状结构,茜素红染色阳性细胞分布在这些网状结构中,成骨诱导形成率为7.43%,与对照组比较差异显著(P<0.05);C组茜素红染色阳性细胞分散而均匀,但未出现网状结构,成骨细胞诱导形成率提高至27.57%,与对照组比较差异极显著(P<0.01)。  相似文献   

土地整理项目管理与决策支持系统的构建   总被引：7，自引：1，他引：7  

高向军  贾文涛  陈原  张中帆 《农业工程学报》2002,18(3):169-172

土地整理项目管理信息化是提高项目管理效率和科学化水平的重要途径。该文从土地整理和土地整理项目的基本概念入手，对项目管理进行了信息化需求分析，阐述了“土地整理项目管理与决策支持系统”研制的背景与现实意义，介绍了土地整理项目管理与决策支持系统的结构与功能，以及系统构建采用的关键技术。  相似文献   

基于ES的植被景观多样性评价模型研究     

林志垒 《勤云标准版测试》2006,(7)

介绍植被景观多样性评价模型的设计思想,然后进行构造其专家系统,该系统采用模块化程序设计技术,分为预处理、综合库、知识库、推理机、知识获取及知识管理和总菜单等6个模块,整个系统在主菜单控制下运行,各模块能独立运行。专家系统程序采用雄风专家系统开发平台VisualXF6.1,GIS由Arc/Info系统支撑。最后以永泰县为应用实例进行研究,创建永泰县植被景观多样性评价专家系统,对全县进行植被景观多样性评价,按景观多样性程度由高到低共评价5个等级,2243.4km2,评价结果与实际情况一致。  相似文献   

小鼠卵母细胞的孤雌激活与ES细胞样集落分离   总被引：1，自引：0，他引：1  

曹鸿国  刘俊平  张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2005,33(3):1-4,10

对小鼠卵母细胞进行孤雌激活用于单性生殖研究。取成年昆明白小鼠进行超数排卵,乙醇激活,同小鼠输卵管上皮细胞共培养并添加mM16培养基培养至早期囊胚阶段,移至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上,换成ES细胞培养液继续培养,分离消化ICM,重新接种,对分离出的ES样细胞集落进行分离培养鉴定。结果显示,小鼠卵母细胞激活率为96.99%,2-细胞发育率为93.17%,桑椹胚发育率为80.33%,囊胚发育率为73.22%。小鼠孤雌激活囊胚中分离的ES样细胞集落具有一系列ES细胞所特有的特征,如呈现出岛屿状形态,碱性磷酸酶染色为阳性,体外能够自发分化成上皮样或单个散在分布的细胞等。试验证明,小鼠孤雌胚中可以分离出ES细胞样集落。  相似文献   

LIF和IGF-1对牛胚胎干细胞分离的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨奇  窦忠英 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2002,30(3):13-16

比较了添加 L IF,IGF- 1和 L IF+IGF对牛胚胎干细胞 (ES)分离的影响。结果表明 :1添加10 ng/m L L IF能提高胚胎贴壁率 ,促进内细胞团 (ICM)和 ES细胞的增殖并抑制其分化 ;2添加 10 ng/m L IGF- 1既能提高胚胎贴壁率 ,又能使 ICM明显增殖的时间和传代后集落出现的时间提前 ;3添加 10 ng/m L L IF+10 ng/m L IGF- 1,可以同时发挥两种生长因子的作用效果 ,更有利于牛胚胎干细胞的分离。  相似文献   

昆明小鼠ES细胞的分离培养及鉴定     

张廷龙  董雅娟  柏学进  赵晶  岳福杰  史文升  龚宜超 《安徽农业科学》2008,36(13):5380-5384

[目的]摸索一种适合昆明小鼠ES细胞分离培养的方法,以提高昆明小鼠ES细胞的建系率。[方法]分别采用5种方法分离ICM和ES细胞集落,摸索了以BMSCs作为饲养层时,丝裂酶素处理的合适时间。[结果]连续消化法要明显好于其他4种方法。MMC处理BMSCs 1、1.5、2 h时效果较好,3个时间点无显著差异(P>0.05)。mMEF作为饲养层与BMSCs作为饲养层时获得5代ES细胞相比差异不显著(P>0.05)。[结论]连续消化法分离ES细胞效率较高,饲养层采用MMC处理1~2 h的BMSCs饲养层或常规mMEF饲养层对昆白小鼠ES细胞无明显影响。  相似文献