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应用Nested PCR技术检测柑桔木虱及其寄主九里香的柑桔黄龙病带菌率 总被引：28，自引：2，他引：28
应用PCR及Nested PCR技术检测柑桔木虱及其寄主九里香的结果表明:PCR只可检测最低2头带菌木虱,Nested PCR可检测到单个带菌木虱。100头带菌木虱中,单虫检出率为96％。检测田间重、中等、轻病的柑桔园内的木虱,其带菌率依次为87％、53％和21％。在病芦柑上饲菌不同天数的木虱均能检测出带菌,其饲菌时间最短为1d。城市九里香叶片及在其叶上取食的木虱单虫,均能用Nested PCR检测出病原。饲菌木虱接种九里香及芦柑健苗,在植株尚未表现症状时,常规PCR难检测出病原,但用Nested PCR则能检测到病原,说明九里香不仅是木虱的寄主,而且是黄龙病病原的隐症寄主。 相似文献
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During early lactation, dairy cows may present a transient immunosuppressive state and develop anaplasmosis caused by Anaplasma marginale. In this study, clinical anaplasmosis in dairy cattle in the Thrace region of Turkey was investigated with respect to within-herd prevalence, vertical transmission, and genetic diversity. In March and September 2015, thirty lactating cows showed primary clinical signs of anaplasmosis, including fever, anaemia, decreased milk yield, anorexia, and laboured breathing. Symptoms disappeared in most cows after administration of long-acting oxytetracycline, but nine of them (30%) died. Following diagnosis based on clinical signs, microscopy and molecular findings, blood samples were collected from apparently healthy lactating cows (n = 184), pregnant heifers (n = 39) and newborn calves (n = 24). DNA was extracted from each sample and analyzed for the presence of major surface proteins (MSPs) of A. marginale, followed by sequencing to assess diversity of isolates. Microscopic examination of erythrocytes revealed A. marginale inclusion bodies in symptomatic cows. Examination of thin blood smears showed 3.8% of the lactating, clinically asymptomatic, cows to be infected with A. marginale, while nPCR detected 31.0% positive. A. marginale infection was not detected in pregnant heifers by either method. Congenital infection was found in one calf by nPCR. This is the first report of transplacental transmission of A. marginale in Turkey. The MSP4 sequence analyses showed high genetic diversity among the isolates, presenting 97.6-99.6% homology at the amino acid level. The sequences of MSP1a amplicons revealed genetic diversity providing three new tandem repeats. 相似文献
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侵染昆明玫瑰的李坏死环斑病毒的鉴定及其分子检测 总被引：1，自引：0，他引：1
采集昆明地区种植的花叶症状明显的玫瑰样品,运用现代分子生物学技术与常规技术相结合的方法,初步鉴定引起玫瑰花叶病的主要病毒病原为李坏死环斑病毒.该病毒引起玫瑰植株的系统花叶、畸形和皱缩等症状;电镜下病毒粒体为球形,直径为22～23nm;ELISA检测发现该病毒在植株芽、花粉和顶部叶片的浓度最高;同时,根据外壳蛋白的保守区利用Primer 5.0设计该病毒的特异引物,对该病毒进行分子检测,得到450bp的预期DNA片断,并在此基础上,进行了巢式RT-PCR的分子检测,表明巢式RT-PCR的检测能力最强.并通过序列的同源性分析得知该病毒的外壳蛋白与已知PNRSV的同源性为98.0%,进一步证明了该病毒为李坏死环斑病毒. 相似文献
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基于嵌套子集方法对南京市城镇化用地时空变化分析 总被引：7，自引：0，他引：7
随着城镇化的加速发展,越来越多的土地资源被占用。本文应用嵌套子集方法,并借助RS和GIS技术,利用1984、1995、2000、2003年4期TM卫星遥感影像,对南京市近20年来城镇扩展情况进行了分析。结果表明:1984─2003年间,随着城市化水平的不断提高,南京市城镇用地面积不断扩大,填充度从1984年的3.5%提高到2003年的7.2%,增加1倍多,并呈嵌套格局,且嵌套程度越来越高;各乡镇填充度的变化表现出差异性,即市区的乡镇、市区周边的乡镇以及在区县的乡镇的填充度增加较大,其他大部分乡镇的填充度虽然都有不同程度的增加,但增加程度不大,还有一些乡镇的填充度没有变化。 相似文献
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嵌套子集:引入土壤多样性研究的讨论 总被引：5，自引：2，他引：5
嵌套子集指在任何特定集合中出现的物种趋向于在更大的集合中也出现,即局部丰富的物种一般分布比较广泛,而局部稀少的物种则分布较窄。本文对嵌套性研究中的有关问题做一评述,并以西班牙的一个研究为范例讨论可以看出,通过数据(土壤类型和土壤集合)试验得出的规律性和生态学上的观点竟非常相似。研究采用了土壤数据集和在计量生态学应用的方法,包括嵌套计算程序(Nested Calcu lator Program)。结果表明:嵌套性在生物群落、土被或土链结构中的性质有相似之处,即地学系统中普遍存在着嵌套性。此方法用于土壤多样性的分析,在有计划的保护生物及土壤资源方面具有现实意义。 相似文献
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山东省禽源致病性大肠杆菌质粒介导喹诺酮类药物耐药基因的检测 总被引：2，自引：0，他引：2
为了解山东省禽源致病性大肠杆菌质粒介导喹诺酮类药物耐药基因分布情况,对2004～2011年间分离的230株禽源致病性大肠杆菌进行了qnrA、qnrB、qnrS基因的PCR检测,结果发现未检出qnrA和qnrB,qnrS基因的检出率为25.22%(58/230)。对部分检出的qnrS基因测序后发现假阳性率较高(8/24),为了提高检测的特异性,建立了检测qnrS基因的套式PCR,测序结果表明该方法检出准确率为100%,使用该方法检出230株细菌中qnrS基因的携带率为16.52%(38/230),表明含qnrS基因的耐药质粒在山东省禽源致病性大肠杆菌中分布较为广泛。 相似文献
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采用酚-氯仿法和煮沸法从南疆绒山羊血液和早期胚胎中提取基因组DNA,分别以雄羊和雌羊的血液基因组DNA和早期胚胎基因组DNA(约20～30胚胎细胞)为模板,以AMEL引物进行PCR扩增和电泳分析.结果表明:绒山羊5ng量和10pg量血液基因组DNA经扩增后雌性只得到1条非特异性带,雄性得到1条非特异性带和1条特异性带;超微量血液基因组DNA样本(10pg)经巢式扩增和电泳分析能够鉴定绒山羊性别;32枚绒山羊胚胎鉴定结果,雄雌性别比17/15;移植胚胎产羔雄雌比15/14.采用牙釉质基因(AMEL),经巢式扩增和电泳分析能够鉴定绒山羊性别,并对胚胎无损伤;南疆绒山羊早期胚胎性别鉴定结果与胚胎移植后产羔性别结果对比,雌雄性别比率差异不显著(P>0.05). 相似文献
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基于牡蛎疱疹病毒DNA聚合酶基因的巢式PCR检测方法的建立及应用 总被引：1，自引：0，他引：1
为了建立适用于Os HV-1不同变异株的检测方法,在牡蛎疱疹病毒(Os HV-1)3个变异株全基因组序列比对的基础上,筛选到牡蛎疱疹病毒基因组中高度保守的DNA聚合酶(DNA polymerase)基因,据此设计巢式PCR引物,优化PCR反应体系和条件,建立了基于Os HV-1 DNA聚合酶基因的巢氏PCR检测方法(P-n PCR检测方法),利用P-n PCR与Cn PCR检测方法对不同年份和宿主来源的Os HV-1疑似感染样本进行检测。结果显示,Pn PCR检测方法能稳定地检出100拷贝/μL的病毒DNA;P-n PCR较C-n PCR检测方法具有更强的特异性和更高的检出率。研究表明,本研究建立的P-n PCR检测方法适用于Os HV-1不同变异株的检测,可为该病毒的检测和流行病学调查提供可靠的技术支持。 相似文献
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