从甜瓜子叶中提取总DNA   总被引：4，自引：1，他引：4  

陆璐  赵长增  陶兴林 《果树学报》2005,22(6):748-750

用分子标记方法检测甜瓜杂交种子纯度,如果从真叶中提取DNA,检测周期至少需要15d。为了缩短检测周期,我们分别以甜瓜的成熟干种子、吸胀水后“露白”种子、3d龄刚转绿子叶、6d龄子叶、9d龄子叶和12d龄子叶为材料,进行了提取总DNA的研究。结果表明:除了干种子和吸胀水后“露白”种子外,其他的材料都可以提取到DNA,但是DNA的质量因子叶日龄不同而存在很大的差异。不同日龄的子叶中,以3d龄子叶提取的DNA质量好。子叶6d龄时,提取的DNA质量次于3d龄,少量DNA开始出现降解,以后随着子叶日龄的增加,DNA降解加重。另外,与以真叶为材料提取的DNA样品相比较,子叶DNA样品中的蛋白质等杂质含量高,应增加氯仿抽提纯化次数。  相似文献   

稻瘟菌诱导性稻叶脂氧合酶的进一步纯化及抗体制备   总被引：1，自引：1，他引：1  

杨依军  秦引萍 《植物病理学报》1997,27(3):243-249

 采用DEAE-Toyopearl离子交换、Buty l-Toyopear l疏水层析、CM-Toyopearl离子交换、Sephacryl S100凝胶过滤和FPLCMono Q等步骤,从非亲和性稻瘟菌侵染稻叶中纯化了两种诱导性脂氧合酶,即CM-Loxl和CM-Lox2。SDS-PAGE检测结果表明:CM-Lox1和CM-Lox2为单链多肽,它们的分子量分别为98 kd和102 kd。利用微量免疫法制备了CM-Lox1和CM-Lox2的抗体,制备的抗体效价达到1:1000倍,能检测0.5~2.0 ng的抗原。免疫印迹杂交证明CM-Lox1和CM-Lox2之间存在密切的血清学关系。此外,Anti-CM-Lox1和Anti-CM-Lox2与水稻中另一稻瘟菌诱导性脂氧合酶RLL以及发芽种子出现的RL-2也存在交叉反应。  相似文献   

生物炭及其在稻田尾水净化中的应用研究进展     

孙鹏  付丽伟  刘善良 《现代农业科技》2023,(22):119-122+135

保障水稻稳定增产事关国家粮食安全。水中的农药、化肥、重金属等物质随稻田尾水流出，排入周边水域，易造成水体面源污染。生物炭具有原材料丰富、孔隙结构发达、比表面积大、离子交换能力强、成本效益高等优势，已被广泛应用于环境修复领域。生物炭经适当改性能增加吸附活性位，提高吸附性能。在促沉净化材料中添加生物炭或生物炭基材料，可增强稻田面源污染促沉净化装置效能，提高稻田尾水利用率，助推农业绿色发展。本文介绍了稻田尾水的特点、常见处理技术及治理意义，阐述了生物炭及生物炭基材料在稻田尾水净化中的应用，展望了稻田尾水防治工作待深入开展的方向，并提出了生物炭材料在参与废水处理上存在的问题，以期为促进生态循环农业发展提供参考。  相似文献   

一株曲霉的一种中温糖化酶的纯化及其部分酶学特性     

莫德姣  刘君梁  冼亮  段承杰  冯家勋 《广西农业生物科学》2010,(3):434-440

本研究从广西花坪自然保护区采集的土壤中筛选获得了一株产糖化酶丝状真菌菌株57-45,通过形态学观察和真菌内转录间隔区（internal transcribed spacer,ITS）序列比对分析,将其初步鉴定为曲霉属（Aspergillus sp.）的一个种。纯化真菌57-45所产的一种胞外糖化酶经过硫酸铵分级沉淀、疏水层析和阴离子交换层析三步蛋白质纯化步骤,得到在SDS-PAGE上约60kD的单一蛋白质条带,薄层层析分析表明该纯化的蛋白质水解可溶性淀粉的产物只有葡萄糖,证明该纯化的蛋白质为糖化酶。纯化的糖化酶Km值为1.9mg/mL,Vmax为4148μmol/（min·mg）,最适作用pH5.5,最适作用温度50℃,在同步糖化发酵中有应用的潜力。金属离子Fe3＋、Zn2＋、Cu2＋对酶活有较强的抑制作用,EDTA对酶活有较强的促进作用。本文结果将为进一步研究曲霉糖化酶的酶学特性提供新的材料。  相似文献   

一株新的豆豉纤溶酶产生菌的研究     

朱春节  汤祝华  谢秀祯 《广西农业生物科学》2011,30(1):7-15

从全国各地采集豆豉样品,经富集培养并利用纤维蛋白平板法获得一株形态与现存产纤溶酶微生物差异较大的菌株HS9。通过传统方法、化学方法以及16SrRNA序列分析对HS9进行分类鉴定,属于Pseudomonas aeruqinosa,是未见报道的产豆豉纤溶酶菌株。发酵培养HS9获得粗酶,经20%~70%硫酸铵梯度盐析、SephadexG-75凝胶过滤以及CM-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析分离纯化后,得到了电泳纯酶。通过SDS-PAGE了解该酶分子量约为34kD,pH8.0~8.5时酶活性最高,最适作用温度48℃,作用方式为直接水解纤维蛋白,胃蛋白酶抑制剂在工作浓度1μmol/L时能完全抑制其活性,推测该酶为天冬氨酸蛋白酶,是一种新型的豆豉纤溶酶。  相似文献   

蓝莓花青素的研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

李金星  胡志和 《核农学报》2013,27(6)

花青素作为一种天然食用色素,与合成色素相比,具有安全性高,资源丰富,且具有一定的营养和药理作用等优点,已在食品、医药、化妆品等领域得到了广泛的应用.近年来,由于蓝莓富含花青素,逐渐成为国内外研究的热点.本文综述了蓝莓的概况、蓝莓花青素的基本结构及种类、提取纯化技术、稳定性及其生理功能的最新研究进展,以期为蓝莓产业化发展中的技术问题提供一定的参考.  相似文献   

干柱层析法制备油茶总皂苷对照品初探     

涂云飞  杜先锋  张雪波 《中国农学通报》2006,22(10):343-343

目的 研究干柱层析法制备油茶皂苷对照品的方法。方法 原料用60 %乙醇超声提取,浓缩至无醇味,石油醚脱酯后用正丁醇按3:1体积比加入萃取。取正丁醇层并真空浓缩至干,干法上样于100目~200目硅胶柱色谱分离,用乙酸乙酯-甲醇-正丁醇-水(2:1:4:7)的上相展层;根据Rf值取出相应的条带并用甲醇淋洗收集蒸干,薄层及理化性质检测。结果 该方法所制样品由薄层色谱为一点,纯度较高。结论 该方法简便、实用且制备量大,可作为油茶总皂苷对照品。  相似文献   

"宁杞1号"枸杞提纯复壮技术研究   总被引：4，自引：1，他引：3  

马金平  李建国  王文华  李军  姜文胜  杨刚  栾茂江 《北方园艺》2009,(8)

"宁杞1号"枸杞是宁夏农林科学院于1987年培育出的枸杞新品种,该品种在促进宁夏枸杞快速发展中起到了举足轻重的作用,据不完全统计宁夏现在种植的枸杞中"宁杞1号"占到70%以上。但随着枸杞栽培年限的增加,导致"宁杞1号"产区茨园不同程度的品种退化和混杂,所以开展"宁杞1号"枸杞提纯复壮是宁夏枸杞发展的当务之急。  相似文献   

猪肌肉生长抑制素基因的克隆及原核表达     

鲍淑青  张克英  陈代文  龙定彪 《动物营养学报》2007,19(5):617-621

本试验旨在通过基因工程方法获得重组肌肉生长抑制素蛋白。根据基因库肌肉生长抑制素基因序列设计合成特异性引物,引物两端分别加上EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点及保护碱基,提取汉普夏猪的骨骼肌总RNA,用RT-PCR方法扩增肌肉生长抑制素全长基因,并将其克隆到pMD18-T载体上,测序后EcoRⅠ和SalⅠ双酶切,克隆到pET-30a( )中,构建原核表达载体pET-30a-M,将重组表达质粒转化至E.coliBL21(DE3)中,诱导表达。结果表明,成功扩增出肌肉生长抑制素全长基因;克隆载体经过DNA序列测定,所得基因与国外报道的完全一致;成功构建原核表达载体pET-30a-M;经IPTG诱导,表达出了6×His-M融合蛋白,用组氨酸标签抗体做Western印记证明产物大约48 ku,与预期大小相符,肌肉生长抑制素蛋白在大肠杆菌中成功的进行了表达。  相似文献   

畜禽舍粪便污水及废气净化的研究   总被引：20，自引：2，他引：20  

汪植三  李其谦  廖新俤  汪俊三  梁敏 《农业工程学报》1995,11(4):90-95

猪场污水经文中所述工艺系统处理以后,污水中的化学耗氧量(COD_Cr)达到98.4mg/L;生物需氧量(BOD₅)达到49.6mg/L;悬浮物(SS)达到51.49mg/L以下;硫化物达1.0mg/L以下:铜和铜化物达到0.6mg/L以下。畜舍中的废气净化,选择挥发性的药材制成“姜满净化剂”,能使畜舍的氨(NH₃)降解率达到73.9％,舍内含氟量为15.0mL/m³;硫化氢(H₂S)降解率达到85.8％,舍内的硫化氢浓度为2.8mL/m³;细菌降低率达到70.7％。  相似文献