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7.
《畜牧与兽医》2017,(6):120-124
为制备检测新城疫病毒的实时荧光RT-PCR病毒样颗粒内标,扩增MS2噬菌体的成熟酶蛋白和衣壳蛋白序列,将其定向插入pET32a载体的相应位置,双酶切和PCR鉴定,构建pET32a-MS2重组质粒;根据新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测的目标片段,采用化学合成和klenow酶连接技术制备内标片段,将内标片段插入pET32a-MS2重组质粒,构建pET32a-MS2-IC重组质粒,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,经RNase和DNase消化后,采用荧光RT-PCR检测耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标的含量。结果表明,制备了高表达量耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标,可用于新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立。 相似文献
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琼脂糖扩散法测定加酶饲料中微量纤维素酶活力的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
采用琼脂糖扩散法对加酶饲料中所含的微量纤维素酶活力进行了测定，并与其它方法进行了比较。试验结果表明，该方法具有灵敏度高、特异性好、操作简单、所需设备少等优点，可在加酶饲料进行纤维素酶活力的测定中推广使用。 相似文献