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1.
本研究旨在探明鸡恒定链(invariant chain,Ii)与内吞体转运蛋白Rab5a和Rab7b结合的结构域和在细胞内共定位的特征。首先,用PCR和基因突变技术将Ii胞浆区与跨膜区[Ii(Cyt-Tra)]、Ii CLIP (class Ⅱ-associated invariant chain peptide)-三聚体区[Ii(CLIP-TRIM)]和Ii突变体[Ii(M81-87aa)、Ii(M91-99aa)和Ii(M81-99aa)]分别插入pET-32a和pEGFP-C1构建相应的原核和真核重组质粒。其次,将构建的含有绿色荧光蛋白的重组质粒与实验室保存的含有红色荧光Rab5a和Rab7b的重组质粒共转染至人胚胎肾细胞系293 T,观察它们的共定位。将构建的原核重组质粒进行表达和纯化,最后用拉下法和免疫印迹检测Ii与Rab5a和Rab7b的结合域。结果表明,成功构建Ii结构域及Ii突变体的重组质粒。Ii(Cyt-Tra)及Ii突变体均能与Rab5a和Rab7b在细胞内共定位,而Ii(CLIP-TRIM)与空载体却不能。Ii的胞浆区和跨膜区是与Rab5a和Rab7b结合的功能结构域,而不是CLIP与三聚体区。综上所述,鸡Ii与Rab5a和Rab7b共定位和结合的区域是其胞浆区和跨膜区,而不是内质网腔区。这些结果提示Rab分子参与了Ii在胞内细胞器的转运机制,为进一步研究Ii及其载体在细胞内的转运机制和功能提供了新的途径。 相似文献
2.
Equine herpesvirus type 1 (EHV-1) is responsible for respiratory disorders, abortion and myeloencephalopathy (EHM) in horses. Two pathotypes of EHV-1 strains are circulating in the field: neurovirulent (N) and non-neurovirulent (NN). For both strains, CD172a+ monocytic cells are one of the main carrier cells of EHV-1 during primary infection, allowing the virus to invade the horse’s body. Recently, we showed that EHV-1 NN strains showed a restricted and delayed replication in CD172a+ cells. Here we characterize the in vitro replication kinetics of two EHV-1 N strains in CD172a+ cells and investigate if the replication of these strains is similarly silenced as shown for EHV-1 NN strains. We found that EHV-1 N replication was restricted to 7–8% in CD172a+ cells compared to 100% in control RK-13 cells. EHV-1 N replication was not delayed in CD172a+ cells but virus production was significant lower (103.0 TCID50/105 inoculated cells) than in RK-13 cells (108.5 TCID50/105 inoculated cells). Approximately 0.04% of CD172a+ cells produced and transmitted infectious EHV-1 to neighbour cells compared to 65% of RK-13 cells. Unlike what we observed for the NN strain, pretreatment of CD172a+ cells with histone deacetylases inhibitors (HDACi) did not influence the replication of EHV-1 N strains in these cells. Overall, these results show that the EHV-1 replication of N strains in CD172a+ cells differs from that observed for NN strains, which may contribute to their different pathogeneses in vivo. 相似文献
3.
Soil protection for a sustainable future: options for a soil monitoring network for Ireland 下载免费PDF全文
The increased recognition of the importance of soil is reflected in the UN Post‐2015 Development Agenda with sustainable development goals that directly and indirectly relate to soil quality and protection. Despite a lack of legally binding legislation for soil protection, the European Commission remains committed to the objective of soil protection. However, the achievement of a legally binding framework for soil protection relies on the implementation of a soil monitoring network (SMN) that can detect changes to soil quality over time. As beneficiaries do not pay for the provision of soil information, the options for soil monitoring are limited. The use of existing data sets should be considered first. Using Ireland as an example, this research explored the opportunities for a SMN for Ireland considering three existing national data sets. The options for a SMN are considered in terms of their spatial and stratified distribution, the parameters to be measured and an economic analysis of the options proposed. This research finds that for Ireland, either a 10 or a 16 km2 grid interval stratified by land use and drainage class offers the best potential in relation to the spatial distribution of existing data sets to reflect local data at a national level. With existing data, the stratified SIS data using the 16 km2 grid offers the best value for money, with baseline costs for analysis, excluding field costs, of between €706 481 and €2.8 million. Acknowledging the impossibility of measuring all parameters with ideal frequency, this study proposes a two‐tier system for optimized monitoring frequency. Parameters must anticipate future policy requirements. Finally, the implementation of a SMN must be accompanied by standardized methods, defined thresholds and action mandates to maintain soil quality within allowable limits. 相似文献
4.
5.
6.
本文用约1000块样地资抖,系统地研究了黑龙江省落叶松人工林的地位指数级导向曲线模型。通过林业统计分析软件Statistica6.0对各落叶松人工林数据进行拟合、分析比较,结果为:从拟合精度、曲线走向与散点分布趋势、残差分布等综合考虑,舒马切尔曲线函数比较适合落叶松人工林地位指数级导向曲线模型的拟合。 相似文献
8.
9.
混合土料是由粗细土颗粒组成的土。作者对混合土料、均匀粗粒土及纯细烂土的颗粒组成与工程性质进行了对比分析。结果表明,混合土料是介于均匀粗粒土和纯细粒土之间的土,它的工程性质有别于均匀粗粒土和纯细粒土,有必要对其单独命名,这为混合土的合理定位与专门研究提供了基础。 相似文献
10.
数量化理论Ⅲ在土地质量综合评价中的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
木文对土地质量综合评价的方法进行了探讨,首次提出将数量化理论Ⅲ应用于土地质量分级。与目前使用的系统聚类、动态聚类方法相比,数量化理论Ⅲ更适合于变量类型为定性变量的土地资源调查资料的分类。它弥补了系统聚类方法和动态聚类方法在土地资源评价中应用的局限性,数量化理论Ⅲ是一种可用于土地质量分级的理想方法。 相似文献