转基因八棱海棠与苹果品种亲和性的微嫁接早期鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

渠慎春  乔玉山  彭明炜  章镇 《果树学报》2005,22(2):97-100,F002

用微嫁接法鉴定嫁接亲和性的结果表明,不同培养基和培养方法对嫁接成活率和生根率有较大影响,生根 愈伤同步的方法可以同时获得较高的嫁接成活率和生根率。转番茄铁载体蛋白基因八棱海棠(Malus micromalus)与 苹果(Malus pumila)品种富士,嘎拉以及新红星嫁接成活率分别为93.33％,92.86％,73.34％。嫁接后15 d左右,接穗 新叶开始生长;嫁接后2个月,嫁接苗移栽成活率分别为73.07％,73.91％和55％;移栽后3个月,3种嫁接苗的茎杆 粗度均匀,无大小脚现象。初步结果显示,转基因八棱海棠与富士、嘎拉均具良好的嫁接亲和性,而与新红星的嫁接 亲和性稍差。  相似文献   

pGH和IGF-Ⅰ双基因共表达载体的构建及转双基因猪的获得与检测     

姚延珠  吴明明  孙金海 《华北农学报》2016,(3):94-100

旨在构建可高效表达pGH基因和IGF-Ⅰ基因的双基因共表达载体,制备转双基因(pGH+IGF-Ⅰ)猪,以期探索pGH基因和IGF-Ⅰ基因对猪生长发育的影响,为节粮型高瘦肉率新品种猪的培育奠定理论基础。从长白猪耳样中提取总RNA,经反转录RT-PCR获得pGH基因不含终止密码子的编码序列和IGF-Ⅰ基因完整的编码序列,经酶切连接克隆至pc DNA3.1(+)真核表达载体上,构建pc DNA3.1(+)-pGH-IGF-Ⅰ双基因共表达载体。将其转染PK15细胞,Q-PCR检测2个目的基因在PK15细胞中的表达情况。将构建的双基因共表达载体用纳米材料包裹后转染长白猪精子,采用精子载体法制备转双基因猪。PCR及测序鉴定转双基因阳性个体,Q-PCR检测2个目的基因在转双基因猪体内的表达情况。PCR及测序鉴定追踪检测转双基因猪体内pGH基因和IGF-Ⅰ基因的稳定情况。RT-PCR及测序结果表明,成功克隆了长白猪的pGH基因和IGF-Ⅰ基因的编码序列。酶切和测序分析表明成功构建了双基因真核共表达载体,转染PK15细胞后,Q-PCR检测表明,pGH基因和IGF-Ⅰ基因均在mRNA水平成功表达。母猪妊娠获得13头仔猪,经PCR及测序检测,其中4头仔猪为转双基因阳性,转双基因阳性率为30.76%。Q-PCR检测外源pGH基因与IGF-Ⅰ基因在转双基因猪体内成功表达。1~7月龄均可检测到外源pGH基因与IGF-Ⅰ基因,证明2个外源基因在转双基因猪体内稳定存在,并未随着生长而丢失。在转双基因公猪的精液中均能检测到2个外源基因,证明外源基因存在稳定传代的可能。  相似文献   

肉牛分子育种的研究进展     

刘晓牧  吴乃科  王爱国  傅金恋 《中国牛业科学》2007,33(5):66-71

分子生物学的发展,使人们能够从分子水平上探讨肉牛的育种.本文综述了肉牛遗传资源的保护和利用、基因组学和转基因技术的研究现状和进展,着重阐述了肉牛基因图谱的构建和数量性状基因座的检测与利用,同时指出肉牛分子育种的前景和存在问题.  相似文献   

转AtDREB1A的银新杨APX和CAT活性检测     

秦红霞  刘敬梅  宋玉霞 《江西农业学报》2007,19(10):89-91

实验结果表明,通过导入拟南芥AtDREB1A基因优化了银新杨对干旱、高盐和低温的耐受性。在相同的干旱、高盐或低温处理下转基因植株的抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活性,均高于对照植株,且差异显著。  相似文献   

转蚕丝芯蛋白基因获得高强纤维棉花植株   总被引：9，自引：0，他引：9  

张震林  陈松  刘正銮  周宝良  张香桂 《江西农业学报》2004,16(1):15-19

采用花粉管通道技术,将棉纤维细胞特异表达启动子(E6)驱动的蚕丝芯蛋白基因导入陆地棉品种"泗棉3号"。共注射600朵花,收获497粒种子。通过GUS报告基因组化检测筛选,获得5株GUS阳性棉株。又经卡那霉素涂叶法鉴定,其中4株具有良好的卡那霉素抗性。用依据E6启动子序列和蚕丝芯蛋白基因序列设计的两对引物,对这5株棉花进行PCR扩增,获得1株转蚕丝芯蛋白基因棉株。纤维品质测定结果表明,这株转蚕丝芯蛋白基因棉花T1代纤维比强度达到34.6cN/tex,比对照"泗棉3号"(比强度为28.6cN/tex)提高了21.0%,T2代纤维比强度比对照平均增高23.3%。  相似文献   

电穿孔技术及其在精子介导转基因中的应用   总被引：2，自引：0，他引：2  

张业顺  张国政  夏定国  赵浩勤 《江西农业学报》2006,18(6):59-61

介绍了电穿孔技术和精子介导转基因技术,同时总结了近年来电穿孔技术在精子介导转基因中的应用进展。  相似文献   

根瘤农杆菌介导的水稻转基因方法的优化研究     

牟晨  金菁  石金磊 《安徽农业科学》2012,(7):3867+3880

[目的]优化根瘤农杆菌介导的水稻转基因方法。[方法]通过对经典水稻转基因方法的优化和改进,高效获得转基因水稻苗。[结果]使用成熟胚,采取升汞灭菌,侵染时农杆菌的OD600值为0.1时,转化效率最高,较原方法提高约23%。[结论]该研究为以根瘤农杆菌介导的水稻转基因研究提供了技术参考。  相似文献   

Establishment of a Conditional Transgenic System Using the 2A Peptide in the Female Mouse Germline     

Satoshi HARA  Takashi TAKANO  Mio OGATA  Reina YAMAKAMI  Yusuke SATO  Tomohiro KONO  Yayoi OBATA 《The Journal of reproduction and development》2014,60(3):250-255

Transgenic mice are essential research tools in developmental biology studies. The 2A peptide allows multiple genes to be expressed simultaneously at comparable levels in somatic cells, but there are no reports of it being used successfully in germ cells. We constructed a Cre/loxP-based conditional vector containing the 2A peptide to significantly enhance the expression of a reporter and target gene from a constitutive promoter in oocytes. Mice with a transgene insertion containing the chicken β-actin promoter, floxed EGFP-polyA cassette, mCherry reporter, 2A peptide and target gene DNA methyltransferase 3A2 (Dnmt3a2) were crossed with TNAP- or Vasa-Cre mice to produce offspring, in which mCherry and DNMT3A2 proteins were highly expressed in oocytes upon Cre-mediated removal of EGFP-polyA. This novel transgenic mouse line based on the 2A expression system can serve as a useful tool for examining gene function during oogenesis.  相似文献   

转基因技术在玉米育种中的运用     

王良发  张守林  卢瑞乾  李长建  李风章  王静  张素芬 《安徽农业科学》2014,(31):10875-10876

就玉米转基因在抗除草剂、抗虫、抗病、抗盐碱等方面取得的成果进行了回顾,以期为我国玉米分子育种研究提供参考。  相似文献   

转基因植物中T-DNA整合的分子特征及表达     

杨晓杰  刘传亮  张雪妍  李付广 《广西农业生物科学》2010,(1):125-130

植物中不同转基因方法转化外源基因的T-DNA整合特征既具有共性,又具有特性,使得转基因的遗传在各独立转化体间呈现多样性,另外多种遗传因子和限制因素使受体植物中外源基因的表达存在下降,甚至出现基因沉默等复杂现象。本文主要对农杆菌介导及裸露DNA直接转化转基因植物中T-DNA的分子特征和转基因表达的影响因子进行了介绍和概述。转化体中转基因的遗传稳定性和表达主要取决于转基因在植物基因组中的整合位置、拷贝数及组成结构。因而,通过对具有表达水平各异的转化体进行深入的遗传分析和分子生物学研究以及转化体之间进行的比较研究,将对转基因技术自身的完善、定点整合以及更有效的利用转基因技术都具有十分重要的意义。  相似文献