一种监测棉铃虫对Bt杀虫晶体蛋白抗性的技术   总被引：1，自引：0，他引：1  

范贤林  芮昌辉  孟香清  梁桂梅  李永平 《植物保护学报》2002,29(3):254-258

研究了以诊断试剂盒监测棉铃虫对苏云金杆菌(Bt)杀虫晶体蛋白(ICP)抗性的技术。将1日龄幼虫在含诊断剂量的饲料中(每毫升饲料含Bt ICP0.01mg)取食7天,以生长至3龄以上的个体作为抗性个体的判断指标;筛选出人工饲料中防腐剂剂量的最佳值为每350毫升饲料中含丙酸2.5ml。经对多个棉铃虫不同抗性种群的验证试验,证明诊断试剂盒检测抗性个体频率较为精确且应用简便。  相似文献   

黑龙江凉水自然保护区苏云金芽孢杆菌的收集与鉴定     

张文飞  ;谢柳  ;赵立仕  ;方宣钧  ;柳参奎 《广西农业生物科学》2009,(4):685-690

黑龙江凉水自然保护区是我国现有保存下来的较大片原始红松林基地之一,总面积6394hm^2,森林覆盖率95％以上。本研究从小兴安岭凉水自然保护区采集土样782份,采用醋酸钠培养基结合高温方法筛选土壤中的芽孢杆菌,通过光学显微镜观察鉴定产生伴胞晶体的苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis．Bt）。总计分离得到芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌分别为1735株和33株,Bt菌株的分离率和出菌率分别为1．90％和4．22％。利用SDS-PAGE和PCR—RFLP方法对筛选获得的成分离株进行了杀虫晶体蛋白和基因型分析,结果表明14株产菱形伴胞的＆菌株,SDS-PAGE电泳分析芽孢后期产生分子量大小130kD蛋白带,PCR-RFLP分析初步鉴定为crylAc基因,其它产圆形或其它不定形晶体蛋白的＆分离菌中,芽孢后期主要蛋白大小为20～150kD不等,PCR—RFLP方法鉴定结合PCR片段测序分析这些菌株含有新型cry4、cry39和cry40基因等。本研究是“中国助资源收鉴与利用”项目组成部分之一,凉水自然保护区苏云金芽孢杆菌的收集与鉴定目的是要对整个东北地区成资源分布和多样性作一个初步评估,实验结果表明东北森林地区具有丰富多样的威菌株和杀虫基因资源。  相似文献   

苏云金芽胞杆菌Bt9875杀虫晶体蛋白可诱导Caspase和Bcl-2家族参与调控HL-60细胞凋亡     

竺利红  施跃峰  吴吉安  梁建根  李翀 《农业生物技术学报》2010,18(1):92-97

研究Caspase家族与Bcl-2家族参与调控苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)Bt9875杀虫晶体蛋白对人急性髓细胞性白血病细胞HL-60的影响.本实验采用MTT法检测了杀虫晶体蛋白诱导HL-60细胞凋亡后的Caspase家族的活性和Caspase凋亡酶抑制剂对杀虫晶体蛋白诱导HL-60细胞凋亡的影响;采用Western blot检测了杀虫晶体蛋白诱导多聚ADP-核糖聚合酶(PARP)降解、Bcl-2/Bax调控和细胞色素C的释放.研究结果表明,杀虫晶体蛋白作用HL-60细胞后,激活了Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9,在48 h内Caspase家族抑制剂(Z-VAD-FMK)、Caspase-3抑制剂(z-DEVD-FMK)和Caspase-9抑制剂(Z-LEHD-FMK)均可显著抑制杀虫晶体蛋白诱导的细胞凋亡;杀虫晶体蛋白可明显上调促凋亡蛋白Bax的表达,同时下调抗凋亡蛋白BCl-2的表达,并观察到胞浆中细胞色素C的释放.初步证明了Bt9875杀虫晶体蛋白诱导的HL-60细胞凋亡是由Caspase家族和Bcl-2家族共同调控的,线粒体途径在诱导细胞凋亡过程中起着重要作用.  相似文献   

Bt毒蛋白抗虫植物基因工程研究（综述）   总被引：20，自引：0，他引：20  

崔洪志  郭三堆 《农业生物技术学报》1998,6(2):166-172

本文简要回顾了苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因在抗虫植物基因工程研究中的进展情况。包括Ｂｔ基因分类,Ｂｔ基因的结构和特性,Ｂｔ毒蛋白的杀虫机理,昆虫对Ｂｔ产生抗性的机制以及抗虫转基因植物的研究,并对其农业生产上的应用进行了展望。  相似文献   

昆虫病原细菌Cip蛋白基因工程菌发酵条件的优化     

游娟  黄建林  曹莉  韩日畴 《河南农业科学》2012,41(6):92-96

昆虫病原发光杆菌属(Photorhabdus)细菌产生的2种胞内晶体蛋白CipA和CipB已在大肠杆菌原核表达系统中进行稳定表达,为进一步提高该蛋白在大肠杆菌中的表达水平,确定工程菌摇瓶培养的最适条件,研究了多种无机离子、装液量、培养基初始pH值、诱导前添加葡萄糖等因素对工程菌摇瓶发酵的影响。结果显示,在发酵培养基中添加10 mmoL/L Mg2+和15 mmoL/LPO43-,调节初始pH值至7.2,装液量为25mL(250mL摇瓶),诱导前添加10g/L葡萄糖时,Cip蛋白的表达量可明显提高,发酵条件优化后CipA和CipB的表达量达到了39%和41%。  相似文献   

水稻抗虫基因工程研究新进展   总被引：6，自引：0，他引：6  

李桂英  许新萍  李宝健  幸亨泰  盛国英  傅家谟 《中国稻米》2003,9(4):12-15

水稻抗虫基因工程为防治水稻害虫开辟了一条崭新的道路。尽管目前已经有许多优良的抗虫转基因水稻株系(种)被批准进入中间试验或环境释放,但是其抗虫水稻基因还存在着许多令人不满的缺点,如外源基因的表达水平不高,转基因植株的抗虫持久性不长等问题。因此,本文对近年来水稻抗虫基因工程所取得的最新研究进展进行了比较全面的综述,特别是对目前已广泛用于水稻抗虫基因工程的Bt杀虫晶体蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因和外源凝集素基因等单基因策略进行了一一详述,并对水稻抗虫基因工程中的多基因策略进行了简单的介绍。  相似文献   

苏云金芽孢杆菌的概况及其研究进展     

白成  刘丽平  鄢小宁  陈奕鹏  彭正强 《热带作物学报》2012,32(8):33-38

苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫剂是对人和环境友好的安全型细菌杀虫剂。目前Bt杀虫剂已被广泛应用,但因使用剂量较大,导致防治害虫时费用过高。若在生物防治中使用超高效的细菌杀虫剂,就可降低其使用剂量。Bt 00-50-5菌株是从美国引进的高效杀虫菌株,其晶体蛋白的特征分析尚未完成,其毒素的作用机理研究也未进行。本项目即将开展如下研究：(1)先用具有特异性杀虫功能的Bt 00-50-5菌株进行发酵,继续完成对防治中国害虫防治效果的评价;再分析细菌的编码杀虫毒素基因和毒素  相似文献   

昆虫病原线虫共生细菌胞内晶体蛋白的研究进展     

游娟梁世中  韩日畴 《昆虫天敌》2005,27(2):76-82

初生型发光杆菌属（Photorhabdus）及嗜线虫致病杆菌属（Xenorhabdus）细菌分别与异小杆线虫属（Heterorhabdltis）和斯氏线虫属（Steinernema）昆虫病原线虫互惠共生。这类昆虫病原细菌在稳定生长期分别产生两种形态各异的胞内晶体蛋白。本文回顾了这类蛋白的研究历史和最新的研究进展，特别是胞内晶体蛋白的理化性质和生物学功能，同时讨论这种晶体蛋白的研究方法与技术。  相似文献   

苏云金芽胞杆菌伴胞晶体蛋白对猪体内蛔虫的作用及其血液生理生化指标的分析     

冯汉利  姚宝安  周艳琴  赵俊龙  孙明  喻子牛 《中国兽医学报》2007,27(4):523-526

感染性猪蛔虫卵以每头份3000个卵的量感染断奶仔猪，于第3天开始肌肉注射不同剂量苏云金芽胞杆菌晶体蛋白（insecticidal crystal proteins，ICPs），每天1次，连续4d。同时测定猪血液生理生化指标，饲喂2个月后收集猪粪便计算虫卵数。结果显示，感染猪出现咳嗽、发热等临床症状，GOT、GPT、ALP、LDH等指标明显升高，经ICPs治疗后又恢复正常。粪便检查，ICPs高剂量组（16．08mg）的EPG（每克粪便虫卵数）为0，而ICPs低剂量组（9．45mg）的EPG为394，未经ICPs作用对照组EPG为2113，差异极显著（P〈0．01），证明ICPs对猪体内猪蛔虫具有较好的杀灭作用。  相似文献   

苏云金杆菌杀虫晶体蛋白作用机制的研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

余健秀  余榕捷 《昆虫天敌》1998,20(4):180-186

自本世纪６０年代以来,由于化学农药引起的环境污染、害虫普遍产生抗药性等原因,生物防治越来越受到人们的重视。在现有的各种生物防治策略中,研究和利用微生物杀虫剂发展很快,最突出的方法是利用苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ,Ｂｔ）进行防...  相似文献