南瓜抗CMV基因的RAPD分子标记筛选     

赵福宽  周辉  高遐虹  林成 《华北农学报》2007,22(1):90-94

以抗病自交系K01和感病自交系K02杂交后自交所得的F2群体为材料,采用分离群体分析法筛选与南瓜抗CMV基因连锁的RAPD分子标记。通过520个随机引物和310组双引物的RAPD扩增分析,共找到了2个与南瓜抗CMV亲本K01中的抗病基因相连锁的分子标记S4391400和S19 S345600。这2个标记与K01的抗病基因的重组率分别为7.5%和11.8%,遗传距离分别为7.1和11.7 cM。  相似文献   

黄瓜花叶病毒山东分离物外壳蛋白基因的克隆及序列分析   总被引：7，自引：1，他引：7  

崔连民  张福进  朱常香  刘学春 《山东农业科学》2005,(4):3-6

对侵染烟草的黄瓜花叶病毒(CMV)山东分离物(SD1)的外壳蛋白(CP)基因进行克隆和序列分析。根据已报道的黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因序列合成两条寡聚核苷酸引物,用免疫捕捉PCR的方法对黄瓜花叶病毒的外壳蛋白基因进行了扩增。将所得的PCR产物通过T4DNA连接酶连接到pET-22b(+)载体上,并转化大肠杆菌DH5α。序列分析表明:CMV-SD1的CP基因全长657bp,编码218个氨基酸;其核苷酸序列与黄瓜花叶病毒亚组Ⅰ的分离物有极高的同源性,达92.7%~94.9%;与亚组Ⅱ的同源性仅为59.3%~59.5%;由此将CMV-SD1分离物归属于CMV亚组Ⅰ。  相似文献   

菊薯(Smallanthus sonchifolius)脱毒快繁的研究   总被引：3，自引：0，他引：3       下载免费PDF全文

杨旭  姜维梅  丁炳扬 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》2006,32(1):51-55

采用菊薯块茎的腋芽进行生长点的剥离,通过组织培养得到了再生植株.经双抗体夹心酶联(DAS-ELISA)法对脱毒植株进行病毒鉴定表明,脱毒的成功率为60%.用无毒苗的茎段(含节)、叶片作为外植体,筛选了从启动、增殖与分化直至生根各阶段的最适培养基,建立了简单良好的再生体系.茎段增殖的最适培养基为MS+BA 1 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1,愈伤组织诱导的最适培养基为MS+BA0.2 mg·L-1+TDZ 0.01 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1,最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.01 mg·L-1.平均移栽成活率达80%以上.  相似文献   

侵染绿花椰菜的黄瓜花叶病毒（CMV）研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

金巧玲  周雪平  刘勇  王志江  李德葆 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》1995,(6)

从杭州市郊菜园表现严重花叶、矮化症状的绿花椰菜病株上获得一病毒分离物Ｃ－９３１。汁液摩擦接种６科２１种植物，Ｃ－９３１可侵染其中的６科１９种；体外抗性测定表明Ｃ－９３１的稀释限点（ＤＥＰ）为１０￣（－２），致死温度（ＴＩＰ）为５５－６０℃，２５℃体外存活期（ＬＩＶ）为４ｄ；提纯病毒粒体球形，平均直径２８ｎｍ；在琼脂双扩散反应中Ｃ－９３１能与ＣＭＶ抗血清呈阳性反应；ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得其衣壳蛋白亚基分子量为２９ｋＤ；用ＣＦ－１１纤维素柱提取受侵植物组织中ｄｓＲＮＡ，电泳鉴定表明共有５个核酸组分，长度（ｋｂ）分别为３．３，３．０，２．２，０．９和０．３５．根据上述性状，Ｃ９３１被鉴定为黄瓜花叶病毒，且该分离物含卫星ＲＮＡ。  相似文献   

转CMV—CP基因番茄后代的田间抗病性   总被引：1，自引：0，他引：1  

汪智渊  薛宝娣 《南京农业大学学报》1997,20(1):39-42

以土壤农杆菌为介导，用叶盘法转化获得的转ＣＭＶ－ＣＰ基因（黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因）番茄工程植株，通过连续选择和自交，得到Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４和Ｒ５代的转化番茄植株。１９９３－１９９４年采用人工接种和田间自然发病两种方式鉴定转化植株对ＣＭＶ病毒的田间抗性。结果表明，转基因番茄植株对ＣＭＶ侵染有高度抗性。人工接种Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４代转化植株的防病效果达５０－７３％。有５０％以上的转基因植株始终  相似文献   

黄瓜花叶病毒丹参株系外壳蛋白基因的克隆和序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

吴志明  温春秀  彭卫欣  吴智红  王云逸  谢晓亮 《河北农业科学》2004,8(2):21-27

从河北安国具有典型花叶症状的大田丹参叶片中分离到病毒病原 ,经过生物学接种、电镜观察和酶联免疫吸附测定表明该离物与CMV有较近的亲缘关系 (记为CMV DS)。从叶片中提取了该病毒的总RNA ,按照CMV外壳蛋白 (CP)基因前后保守区序列 ,设计合成了 1对特异引物 ,采用RT PCR法扩增了 780bp的全长CP基因的cDNA序列 ,将其克隆到pGEM T载体上 ,并进行序列分析。结果重组克隆序列长为 778bp ,含 1个开放阅读框架 (ORF) ,长度为 65 7nt,编码 2 1 8个氨基酸组成的蛋白。与国内外报道的CMV株系序列比较 ,CMV DS和亚组Ⅰ株系的核苷酸序列和氨基酸序列的同源性为 93 3%～ 99 4%和95 9%～ 1 0 0 % ;而与亚组Ⅱ株系的核苷酸和氨基酸序列同源性仅为为 78 4%～ 79 0 %和81 2 %～ 83 0 % ,表明CMV DS与CMV亚组Ⅰ的株系较亚组Ⅱ株系同源关系更密切 ,将其划归为CMV亚组IB中 ,这是首次在丹参上发现的CMV株系。  相似文献   

人工接种CMV后辣椒植株中病毒含量的时序变化及症状表型     

王兴兴  张正海  曹亚从  王立浩  张宝玺 《中国蔬菜》2016,1(10):59-62

以5份不同类型的辣(甜)椒为供试材料,人工接种CMV重花叶型株系,通过DAS-ELISA方法,分别检测接种5、10、15、20、25、30d后辣椒植株中CMV含量的时序变化,同时对供试材料进行人工接种抗性鉴定,并对2种方法得到的数据进行相关性分析。结果显示:不同类型供试材料接种5~15d后的病毒含量逐渐增加,并于15d时达到最高水平,之后略有回落;通过DAS-ELISA检测得到的植株病毒含量与人工接种抗性鉴定得到的病情指数呈正相关,说明2种鉴定方法获得的结果一致。  相似文献   

综合防治烟草黄瓜花叶病研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

李瑞明  马辉刚  胡水秀  李佑远 《植物保护学报》1994,21(4):317-320

作者报道了综合措施防治烟草黄瓜花叶病(CMV)的研究结果。结果表明,以营养钵育苗移栽后覆盖地膜措施的防病增产效果好,移栽后46天,防治效果为73.87％,增产54.78％。其原因是,它综合了营养钵育苗移栽缩短感病时间和地膜驱蚜的双重机制。  相似文献   

中国北方番茄主要病毒种类普查及TMV、CMV株系鉴定   总被引：3，自引：0，他引：3  

冯兰香  田如燕  杨翠荣  杨又迪 《植物保护学报》1996,23(1):51-55

1990—1994年,对中国北方15省(市)番茄4种主要病毒种类进行了普查,在3761份样本中,烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)的检出率分别为34.5％—65.7％和11.6％—62.6％,马铃薯X病毒(PVX)和马铃薯Y病毒(PVY)的检出率一般为10％—20％。与此同时,也对番茄上的TMV和CMV进行了与抗病毒育种紧密相关的株系分化研究,在333个TMV分离物中鉴定出0、1、2和1.2株系,以0和1株系为主,在绝大多数省(市)中分别占分离物的50％和30％以上;在232个CMV分离物中鉴定出轻花叶、重花叶、坏死和黄化株系,以轻花叶和重花叶株系为主,在绝大多数省(市)中分别占分离物的30％和50％以上,这一研究结果为番茄病毒病的综合防治和抗病毒育种提供了科学依据。  相似文献   

A Severe Hellenic CMV Tomato Isolate: Symptom Variability in Tobacco, Characterization and Discrimination of Variants     

A. P. Sclavounos  A. E. Voloudakis  Ch. Arabatzis  P. E. Kyriakopoulou 《European journal of plant pathology / European Foundation for Plant Pathology》2006,115(2):163-172

A severe strain of Cucumber mosaic virus (CMV) originating from an infected tomato plant (Gastouni-Olympia, Greece) was isolated in tobacco (Nicotiana tabacum cv. Xanthi nc), after three serial local lesion passages in Chenopodium quinoa and designated CMV-G. CMV-G induces yellow mosaic (YM) symptoms in tobacco. When CMV-G was passed mechanically through C. quinoa, phenotypic variants inducing YM or green mild mosaic (MM) in tobacco were isolated. Aphid transmission, from different hosts, appears to be an effective approach for separating MM variants of CMV-G from YM variants. In particular, aphid transmission from zucchini proved to be very efficient in selecting for MM variants. In contrast, aphids transmitted only YM variants from tomato plants. Molecular characterization of CMV-G and its progeny resulted in their classification in the CMV subgroup IB, free of satellite RNA, being the first discovery of the subgroup IB in Greece. In the Solanaceae family (tobacco, tomato, pepper) YM variants induced more severe symptoms than the MM variants. YM and MM phenotype was stable in tobacco for all seven passages tried using the obtained YM and MM variants. Cross-protection experiments showed that an isolated MM variant was able to protect tobacco plants against a challenge infection by a YM variant.  相似文献