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1.
聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定禽呼肠孤病毒 总被引:1,自引:0,他引:1
从感染禽呼肠孤病毒的细胞中,以SDS和酚提取病毒核酸,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法将分节段的核酸分开,经银染色显示,呈3-3-1-3分布,此法可用于禽呼肠孤病毒的快速检测、鉴定。同样方法未能使传染性法氏囊病毒核酸显示。 相似文献
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8.
禽多杀性巴氏杆菌C48-1成熟外膜蛋白H基因原核表达最适条件的探索 总被引:1,自引:0,他引:1
应用PCR扩增出禽多杀性巴氏杆菌C州成熟外膜蛋白H基因(ompm H),将ompm H片段按正确的阅读框定向插入原核表达载体pGEX-6P-1中谷胱甘肽转移酶(GST)基因的下游,获得了重组表达质粒pGEX-ompm H。然后将重组质粒转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),当转化菌的D600nm值达到0.6~0.8时,对异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)的诱导浓度、诱导时间和诱导温度等条件进行了试验,根据聚丙烯酰胺凝胶电泳判定融合蛋白GST-ompm H表达的最适条件。结果,当细菌的D600nm值为0.6~0.8时,IPTG最佳诱导浓度为0.8mmol/L,最佳诱导时间为4h,最适诱导温度为25℃。并用免疫印迹法对表达产物进行检测。结果显示表达的融合蛋白GST-ompm H能与C48-1外膜蛋白免疫血清发生特异性反应,证明pGEX-6p-1载体表达的融合蛋白保留了天然蛋白的抗原性。 相似文献
9.
运用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对大豆茎干溃疡病菌Diaporthephaseolorumvar.caulivora(DPC)的12个菌株进行了可溶性蛋白质、酯酶同功酶的检测试验,结果12个菌株的可溶性蛋白质、酯酶同功酶的特征性电泳谱带均显现出较强的一致性和稳定性。与其同属同种不同变种的大豆黑点病菌Diaporthephaseolorumvar.sojae(DPS)的特征性电泳谱带相比有明显的差异,成为对DPC有鉴定价值的标准 相似文献
10.
随着分子生物学的发展,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析技术在小分子量PCR产物的分离中的应用越来越多,但因操作步骤繁多、耗时长,不利于大量分析工作的开展。对聚丙烯酰胺凝胶电泳的银染方法做些改进,合并常规银染过程中的固定和银染两步骤。与常规方法相比,该方法具有操作简便、耗时短、条带清晰的特点,该方法适用于实验室大规模PCR产物的分离。 相似文献