影响体细胞核移植效率的因素   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘亚  章孝荣 《动物医学进展》2003,24(6):35-38

哺乳动物体细胞核移植 (克隆 )是近年来迅速发展起来的一项新技术 ,对濒危动物保护、优良种畜快速扩群以及核质关系的研究、药物试验等诸多领域都具有重大意义。但体细胞核移植是一项程序繁杂的工作 ,每一步操作所采用的试剂、材料和方案等都会影响到核移植效率 ,因而其影响因素十分众多。文章根据目前已有资料 ,论述了卵母细胞来源、卵母细胞与供体细胞的胞质容量、卵母细胞的去核方案、体细胞供体动物的年龄、供体细胞的组织来源与传代次数及供体细胞的冷藏、冷冻和所处的细胞周期阶段对核移植效率的影响。另外 ,对重组胚的融合 -激活方案、核移植方案及重构胚的培养方案对核移植效率的影响也作了简要论述。  相似文献   

转基因猪的研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

王超侍福梅  李学伟 《动物科学与动物医学》2005,22(5):62-63

转基因猪的研究中最常用的技术方法是核显微注射法。其原理是在显微镜下将外源基因注入到原核期或经重构发育至原核期的受精卵细胞的胚胎原核中，注射的外源基因与胚胎基因组融合，然后进行体外培养，最后移植到受体母畜子宫内发育，这样分娩的动物体内的每一个细胞都含有新的DNA片段，此即转基因后代。  相似文献   

山羊体细胞核移植研究进展     

胡日查  王玉宝  吴科榜 《畜牧与饲料科学》2010,31(9)

体细胞核移植是目前生物技术领域的研究热点之一.山羊是转基因动物研制的理想模型,又是畜牧业生产中的一个重要畜种,而且还可以用转基因奶山羊进行乳腺生物反应器的研究等,因此,山羊的体细胞核移植具有较大的研究价值.就山羊体细胞核移植的研究情况进行了概述.  相似文献   

水牛卵母细胞去核方法的比较     

陈自洪杨素芳  谢英李日聪  韦精卫石德顺 《中国兽医科技》2006,36(6):493-496

水牛卵母细胞体外成熟22h后，分别用盲吸法、点击法和纺锤体成像系统（Spindle—View System）去核。结果，三者的去核率分别为65．1％、81．8％和95．0％，差异极显著（P〈0．01）。以水牛胎儿成纤维细胞为供体，通过核移植构建的重构胚的融合率、分裂率和囊胚发育率，在上述3种方法之间均没有显著差异（P〉0．05）。认为点击法是一种较为简单、实用和有效的去核方法。  相似文献   

哺乳动物的克隆技术——哺乳动物克隆的原理、方法、影响因素及存在的问题   总被引：1，自引：0，他引：1  

张荣昌  岳福杰  李森远  张廷龙 《中国畜牧兽医》2006,33(10):55-58

哺乳动物细胞克隆是20世纪末生命科学领域最引人注目的高新技术,该技术对于优良种畜的复制、减少试验用动物数目、动物遗传多样性保存及濒危动物挽救、转基因动物培育等方面具有重要意义。近年来克隆技术发展迅速,多种哺乳动物相继克隆成功,但也存在克隆效率太低、克隆动物表型正常而实质异常的问题。作者阐述了动物克隆的基本原理、操作方法及其相关影响因素,提出了解决相关问题的关键。  相似文献   

卵母细胞去核及卵丘细胞移核方法对猪体细胞核移植的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

索永善  曹胜兰  李跃民 《黑龙江畜牧兽医》2006,(7):15-17

以猪体外成熟卵母细胞周围分离得到的卵丘细胞作为猪体细胞核移植的供核细胞,研究了卵母细胞不同去核方法(盲吸法、活性荧光染色去核法、盲吸法和活性荧光染色法联合去核法)的去核率差异,并比较了卵丘细胞透明带下注核和胞质内注核两种重建胚构建方法的胚胎裂解率、4 8细胞发育率和桑椹胚率的差异。结果表明:(1)以荧光染料染色法的去核率(87.18%)最高,与其他试验组相比差异显著(P<0.05);盲吸法去核所用时间最少(1.2 min/个),与其他试验组相比差异显著(P<0.05)。(2)透明带下注核比卵母细胞质内直接注核的卵裂率(40.11%/29.75%)和4 8细胞率(11.86%/6.81%)高,差异显著(P<0.05);桑椹胚率(1.75%/1.79%)无明显差异(P>0.05)。  相似文献   

猪卵母细胞去核方法的改进     

张德福  刘东  汤琳琳  陈晓宇  LIN Cai-lu 《中国兽医学报》2006,26(5):574-577

对猪体细胞克隆技术中关键步骤之一的去核方法作了较深入的研究。结果表明，由本实验室改进的Willadsen去核法——二步挤压去核法，无论在去核操作成功率（73．9％）上还是在去核效率（81．2％）上都明显好于McGrath-Solter去核法（42．5％、67．4％，P〈0．05）；同时，本试验还发现，卵母细胞成熟培养36h后去核组去核效率（89．1％）显著地高于成熟培养44h后去核组（55．8％，P〈0．05），而核移植重构胚的发育率2个组间无显著差异。  相似文献   

日本牛核移植技术的研究进展     

邴印忠  车丽美 《世界农业》1999,(12):37-39

近年来，关于动物繁殖技术的研究方兴未艾，特别是１９９７年２月，Ｎａｔｕｒｅ报道了世界首例应用成年绵羊体细胞———乳腺上皮细胞，经过核移植技术，成功地获得了克隆后代———“多利”后，许多国家政府和科学家为之震动，一时成为人们议论的焦点，这一研究成果在我国也被评为１９９８年度世界十大科技新闻之一。日本在核移植领域的研究当属世界领先地位，１９９８年１２月，Ｓｃｉｅｎｃｅ报道了日本近代（Ｋｉｎｋａ）大学的角田教授应用一头牛卵丘细胞和输卵管上皮细胞获得８头克隆后代。日本政府也十分关注这一技术的研究和开发，…  相似文献   

中华鲟胚胎细胞的冷冻保存及其核移植     

余来宁 《水产学报》2007,31(4):431-436

为了保存濒危鱼类中华鲟种质资源,对其囊胚细胞和原肠细胞进行了冷冻保存和核移植试验。用二甲亚砜(DMSO)、1,2-丙二醇(PG)、羟乙基淀粉(HES)3种抗冻剂,配制4种冷冻保护液:CP1(12%D)、CP2(10%P)、CP3(8%D 6%E)、CP4(7%P 6%E),冷冻细胞存活率分别为47.4%±4.7%、64.4%±3.6%、54.7%±4.7%、76.7%±5.7%,CP4保存效果最好,说明添加非渗透型抗冻剂羟乙基淀粉能提高冷冻保存细胞的存活率。比较了两种冷冻方法,发现细胞在-7℃平衡30min之后直接投入液氮的一步冷冻降温法是可行的。对不同发育时期的胚胎细胞冷冻存活率进行了比较,结果表明原肠细胞冷冻存活率(64.4%±11.8%)明显比囊胚细胞的(57.1%±11.2%)高(P<0.05)。用冷冻复苏后的囊胚细胞和原肠细胞作供体,以中华鲟未受精卵作受体进行核移植,各移植了469和392枚卵,分别获得了5尾和2尾克隆鱼,核移植成功率分别为1.1%和0.5%。表明可通过冷冻保存胚胎细胞结合核移植技术保存鱼类种质资源。  相似文献   

鱼类核移植研究工作的新进展     

新建  彭本初 《现代渔业信息》1997,12(1):23-24

鱼类核移植是遗传工程研究的一个重要组成部分,也是国内外遗传育种的研究课题。作者全面概述了鱼类核移植工作的新进展及面临的问题。  相似文献