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弓形虫微线体蛋白MIC3基因的克隆及原核表达
引用本文:江涛,周艳琴,刘琴,聂浩,姚宝安,赵俊龙.弓形虫微线体蛋白MIC3基因的克隆及原核表达[J].畜牧兽医学报,2006,37(6):587-591.
作者姓名:江涛  周艳琴  刘琴  聂浩  姚宝安  赵俊龙
作者单位:1. 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070;华中农业大学动物医学院,武汉,430070;荆州职业技术学院,荆州,434100
2. 华中农业大学动物医学院,武汉,430070
3. 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070;华中农业大学动物医学院,武汉,430070
基金项目:教育部高等学校博士点科研基金项目(20040504016);教育部重点科研项目(105120)
摘    要:根据编码MIC3的已知基因序列设计并合成一对引物,应用PCR技术从弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码MIC3的全长基因,克隆入pGEX-KG表达载体,转化入E.coli DH5α感受态细胞,经含氨苄青霉素琼脂平板筛选,小量抽提质粒进行酶切、PCR及DNA测序鉴定.然后阳性重组质粒转化入E.coli BL21-CodonPlus,IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot分析鉴定.结果显示,扩增的MIC3基因与GenBank中相应基因序列(AJ132530)的同源性达99.6 %,表达的MIC3融合蛋白表观分子量约为66 ku,且可被兔抗弓形虫免疫血清识别.说明所获得的表达蛋白质具有一定的反应原性,为下一步利用重组蛋白建立弓形虫的诊断方法和研制弓形虫的亚单位疫苗奠定了基础.

关 键 词:龚地弓形虫  MIC3  基因克隆  表达
文章编号:0366-6964(2006)06-0587-05
收稿时间:2005-06-14
修稿时间:2005-06-14

Cloning and Protokaryon Expression of the Toxoplasma gondii MIC3 Gene
JIANG Tao,ZHOU Yan-qin,LIU Qin,NIE Hao,YAO Bao-an,ZHAO Jun-long.Cloning and Protokaryon Expression of the Toxoplasma gondii MIC3 Gene[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2006,37(6):587-591.
Authors:JIANG Tao  ZHOU Yan-qin  LIU Qin  NIE Hao  YAO Bao-an  ZHAO Jun-long
Institution:1. National-Key Laboratory of Agricultural Microbiology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China; 2. College of Veterinary Medicine, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China; 3. Jingzhou Institute of Technology, Jingzhou 434100, China
Abstract:
Keywords:Toxoplasma gondii  MIC3  gene clone  expression
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