| 马立克氏病病毒Rispens株和RL株B抗原基因的分离、克隆及初步酶切分析 |
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| 引用本文： | 邢力,彭大新,刘秀梵,张如宽,吴艳涛.马立克氏病病毒Rispens株和RL株B抗原基因的分离、克隆及初步酶切分析[J].中国兽医学报,1998(4). |
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| 作者姓名： | 邢力 彭大新 刘秀梵 张如宽 吴艳涛 |
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| 作者单位： | 扬州大学农学院动物医学系 |
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| 基金项目： | 江苏省科委应用基础研究项目 |
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| 摘 要： | 将马立克氏病病毒（ＭＤＶ）血清Ⅰ型Ｒｉｓｐｅｎｓ株和ＲＬ株分别接种于原代鸡胚成纤维细胞，待出现８０％以上细胞病变后收获，经蛋白酶Ｋ消化，酚、氯仿抽提，乙醇沉淀细胞和病毒的总ＤＮＡ（ｔｏｔａｌＤＮＡ）。以此为模板，根据已发表的Ｂ抗原基因核苷酸序列设计１对引物，通过聚合酶链式反应（ＰＣＲ）扩增出１条约２．８５ｋｂ的特异性条带，斑点杂交证实其为Ｂ抗原基因。双酶切消化后，克隆到质粒ｐＵＣ１９中。酶切分析表明，在这２株病毒的Ｂ抗原基因上，ＨｉｎｄⅢ、ＥｃｏＲＶ、ＢａｍＨＩ、ＥｃｏＲＩ的酶切位点分布与超强毒ＲＢＩＢ株、标准强毒ＧＡ株的完全相同。
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| 关 键 词： | 马立克氏病病毒 B抗原 聚合酶链式反应（PCR） 限制性酶切分析 |
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