Ri质粒介导TMV和CMV外壳蛋白基因转化烟草的研究 |
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引用本文: | 刘伟华,任如意.Ri质粒介导TMV和CMV外壳蛋白基因转化烟草的研究[J].中国农业科学,1997,30(6):61-66. |
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作者姓名: | 刘伟华 任如意 |
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作者单位: | 哈尔滨师范大学生物系,哈尔滨 150080 牡丹江师范学院生物系 |
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基金项目: | 黑龙江省“八五”科技攻关资助 |
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摘 要: | 利用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)Ri质粒介导的二元载体法,将pBTC-8质粒上的TMV-cp和CMV-cp基因导入烟草中。采用烟草叶片与农杆菌菌液共培养的方法,诱导出毛状根,经卡那霉素抗性筛选,进一步诱导出愈伤组织并分化再生出完整植株,转化根和植株表现卡那霉素抗性并检测到冠瘿碱的存在。PCR扩增和DNA斑点杂交的结果证明了TMV和CMV外壳蛋白基因已导入到烟草中,同时利用斑点免疫结合法的血清学实验,检测到转化株中有TMV-cp和CMV-cp基因的产物,从而进一步证明了TMV-cp和CMV-cp基因在转化的烟草中得到表达。
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关 键 词: | Ri质粒 TMV-cp和CMV-cp基因 转化 烟草 |
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