| 西瓜渗调蛋白ClOsm基因克隆及其编码蛋白的抑菌活性 |
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| 引用本文： | 黄小忠,韦 湘,徐晓燕.西瓜渗调蛋白ClOsm基因克隆及其编码蛋白的抑菌活性[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2021,49(11):62-68. |
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| 作者姓名： | 黄小忠 韦 湘 徐晓燕 |
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| 作者单位： | 江苏农林职业技术学院 茶与食品科技学院 |
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| 基金项目： | 江苏农林职业技术学院科技项目（2020kj064） |
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| 摘 要： | 【目的】克隆西瓜（Citrullus lanatus (Thunb.) Matsum. et Nakai）渗调蛋白基因ClOsm，明确该基因编码蛋白的抑菌活性，为进一步研究ClOsm基因功能并开展西瓜抗病分子育种奠定基础。【方法】采用同源克隆法，克隆西瓜ClOsm基因，分析其序列特征，并构建系统进化树。利用实时荧光定量PCR（RT-PCR）技术分析ClOsm基因的表达特征。利用原核表达系统表达并纯化His-ClOsm重组蛋白，检测其对枯萎病菌、蔓枯病菌、白粉病菌、茄病镰刀菌和轮枝镰刀菌的体外抑菌活性。【结果】从枯萎病菌侵染的西瓜根系组织中克隆到渗调蛋白基因ClOsm（GenBank登录号为MF445019），其长度为768 bp，编码255个氨基酸，预测蛋白质分子质量为27.52 ku，等电点为7.78。氨基酸结构分析显示，ClOsm含有TLP蛋白的保守结构域。系统进化分析表明，ClOsm与冬瓜BhOsm蛋白的亲缘关系最近，相似度达95%，且归为osmotin类型的类甜蛋白。实时荧光定量分析显示，ClOsm基因在西瓜根、茎、叶组织中均有表达，根中表达量最高；枯萎病菌侵染能够显著诱导ClOsm基因的表达，在侵染120 h时表达量最高。融合蛋白His ClOsm体外抑菌活性检测结果表明，ClOsm蛋白可以显著抑制枯萎病菌、蔓枯病菌、白粉病菌、茄病镰刀菌和轮枝镰刀菌等病原菌的生长，抑制率分别为70.2%,60.8%,65.3%,55.4%和46.6%。【结论】克隆了西瓜ClOsm基因，并纯化得到ClOsm重组蛋白，该蛋白能够显著抑制病原真菌的生长。
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| 关 键 词： | 西瓜 渗调蛋白 基因表达 抗病育种 抑菌活性 |
| 收稿时间： | 2020/11/25 0:00:00 |
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