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地衣芽孢杆菌GXN151的纤维素酶基因cel12A的序列分析及其在大肠杆菌中的表达
引用本文:刘永生,冯家勋,段承杰,赵广存,柏学亮,张成刚,唐纪良,马庆生.地衣芽孢杆菌GXN151的纤维素酶基因cel12A的序列分析及其在大肠杆菌中的表达[J].广西农业生物科学,2003,22(3):194-200.
作者姓名:刘永生  冯家勋  段承杰  赵广存  柏学亮  张成刚  唐纪良  马庆生
作者单位:1. 中国科学院,沈阳应用生态研究所,辽宁,沈阳,110015
2. 广西大学,分子遗传学研究所,广西,南宁,530005;广西大学,微生物及植物遗传工程教育部重点实验室,广西,南宁,530005
3. 广西大学,分子遗传学研究所,广西,南宁,530005
基金项目:国家863计划"(2001AA214151),"国家国际合作重点项目计划"(2002AA217121)
摘    要:地衣芽孢杆菌菌株GXNl51的cell2A基因为783bp,可编码含261个氨基酸的羧甲基纤维素酶Cel12A,Cel12A的N-末端第1~28氨基酸具典型的信号肽特征、第9~31氨基酸具跨膜功能域特征、第104~261氨基酸形成家族12糖基水解酶(glycosyl hydrolase)功能域。将编码其第73-261氨基酸的DNA序列克隆到大肠杆菌表达载体pET一30a( )得表达质粒pGXNl2A,用1mmol/IPTG诱导处理JMl09(DE3)/pGXNl2A的培养液6h pGXNl2A的表达量达到最高,在JMl09(DE3)和BL21(DE3)pLysS中该表达蛋白质可分别占菌体胞内总蛋白的54.3%和20.9%。在含羧甲基纤维素的LA平板上JMl09(DE3)/pGXNl2A和BL21(DE3)pLysS/pGXNl2A表现有较弱的羧甲基纤维素酶活性,说明重组的Cell2A的催化功能域具有独立的催化活性。包含体检测表明pGXNl2A在JMl09(DE3)中的表达产物大部分形成不溶性包含体。

关 键 词:地衣芽孢杆菌  纤维素酶基因  序列分析  大肠杆菌  表达
文章编号:1008-3464(2003)03-0194-07
修稿时间:2003年4月18日

Sequencing of cellulase gene cel12A of Bacillus licheniformis strain GXN151 and its expression in Escherichia coli
Abstract:
Keywords:Bacillus licheniformis  family 12 glycosyl hydrolase  cellulase  expression in Escherichia coli
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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