薏苡AFLP体系的建立与优化 |
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引用本文: | 孙凤梅,沈晓霞,沈宇峰,张启坤,王志安.薏苡AFLP体系的建立与优化[J].浙江农业学报,2014(1). |
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作者姓名: | 孙凤梅 沈晓霞 沈宇峰 张启坤 王志安 |
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作者单位: | 浙江中医药大学;浙江省中药研究所;浙江省微生物研究所; |
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基金项目: | 国家中医药管理局中医药行业科研专项(201107011);浙江省中药材新品种选育重大科研专项(2012C12912);浙江省药用植物种质改良与质量控制技术重点实验室(2011E10015) |
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摘 要: | 以30个不同薏苡种质为试验材料,利用AFLP分子标记技术进行遗传多样性及亲缘关系的研究。通过对AFLP常规流程中(基因组提取、酶切、连接、预扩增、选择性扩增、电泳及银染检测)关键因素进行优化,建立适合薏苡的AFLP扩增检测体系。结果表明,采用酶切与连接分开的两步法,酶切完全,每步反应时间4h并附加15 min的酶失活时间;连接产物稀释10倍;预扩增产物稀释50倍,试验效果最佳。应用优化后体系,从64对引物中筛选出14对多态性较好的薏苡AFLP选择性扩增引物。
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关 键 词: | 薏苡 分子标记 AFLP体系 |
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