| 蒺藜苜蓿E3泛素连接酶U-box基因克隆及表达分析 |
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| 引用本文： | 邵麟惠,郑兴卫,李聪.蒺藜苜蓿E3泛素连接酶U-box基因克隆及表达分析[J].草业学报,2016,25(7):62-72. |
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| 作者姓名： | 邵麟惠 郑兴卫 李聪 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100193 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31372362)项目和“十二五”国家科技支撑计划项目(2011BAD17B01) |
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| 摘 要： | 泛素化在植物生长和发育过程中起重要作用,E3泛素连接酶负责对靶蛋白特异性识别,其中U-box结构的E3泛素连接酶具有调控植物生长发育和免疫反应等功能,并在抗逆性方面发挥作用。目前,关于蒺藜苜蓿U-box家族基因的研究尚未见报道。本研究从蒺藜苜蓿中克隆得到U-box(MtPUB4)基因,该基因cDNA全长2448bp,编码815个氨基酸,包括1个U-box结构(C-X2-H-X7-C-X7-C-X2-C-H-X2-H)和5个ARM结构域,属于U-box/ARM类型E3泛素连接酶。构建原核表达载体pET-MtPUB4,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)表明在大肠杆菌中表达了MtPUB4蛋白。荧光定量PCR分析表明MtPUB4基因在蒺藜苜蓿花中的表达量最高,在根中表达量最低。MtPUB4基因受到NaCl、聚乙二醇、脱落酸诱导,随着诱导时间增加,表达量呈现出增长趋势。这些结果表明,MtPUB4基因在蒺藜苜蓿生长发育和抗逆性中可能起到重要调节作用,但在低温胁迫中表达量稍微下降,变化不明显。本研究成功构建了pBI121-MtPUB4植物表达载体,为进一步转化拟南芥突变体Atpub4奠定了基础。
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| 关 键 词： | 蒺藜苜蓿 E3泛素连接酶 U-box 基因克隆 表达分析 |
| 收稿时间： | 2016-03-02 |
Cloning and expression analysis of a U-box gene of E3 ubiquitin ligase from Medicago truncatula |
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| SHAO Lin-Hui,ZHENG Xing-Wei,LI Cong.Cloning and expression analysis of a U-box gene of E3 ubiquitin ligase from Medicago truncatula[J].Acta Prataculturae Sinica,2016,25(7):62-72. |
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| Authors: | SHAO Lin-Hui ZHENG Xing-Wei LI Cong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Medicago truncatula E3 ubiquitin-ligase enzyme U-box gene cloning expressing analysis |
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