| 珍稀泌盐植物长叶红砂两个ＷＲＫＹ转录因子的克隆及表达分析 |
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| 引用本文： | 王佳,郑琳琳,顾天培,王学峰,王迎春.珍稀泌盐植物长叶红砂两个ＷＲＫＹ转录因子的克隆及表达分析[J].草业学报,2014,23(4):122-129. |
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| 作者姓名： | 王佳 郑琳琳 顾天培 王学峰 王迎春 |
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| 摘 要： | 根据长叶红砂转录组数据信息，选取在盐胁迫处理后表达上调明显且注释结果为ＷＲＫＹ 转录因子的两个ｃＤＮＡ 片段。通过ｃＤＮＡ 末端快速扩增技术（ｒａｐｉｄａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｃＤＮＡｅｎｄｓ，ＲＡＣＥ），从长叶红砂中克隆获得２个ＷＲＫＹ基因。在ＮＣＢＩ数据库比对与拟南芥At ＷＲＫＹ ３３同源性分别为７９％和８７％，因此命名为Rt ＷＲＫＹ３３-１和Rt ＷＲＫＹ ３３-２。其中Rt ＷＲＫＹ３３-２的ｃＤＮＡ 全长２１６３ｂｐ，开放阅读框（ｏｐｅｎｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅ，ＯＲＦ）长度为１６８１ｂｐ，编码５７３个氨基酸；Rt ＷＲＫＹ ３３-１的ｃＤＮＡ 全长２１５５ｂｐ，开放阅读框长度为１７７６ｂｐ，编码５９１个氨基酸。氨基酸序列分析表明这两个基因均具有两个ＷＲＫＹ 结构域，属于典型的Ｉ类ＷＲＫＹ 转录因子。蛋白结构预测分析发现，两个蛋白的一级结构和二级结构在ＷＲＫＹ 结构域的氨基酸序列和结构特性的相似性较高，但是在非保守结构域部分，尤其是Ｎ 末端（１～８０ａａ之间）、第１个ＷＲＫＹ 结构域之前（１９０～２４０ａａ之间）和两个ＷＲＫＹ 结构域之间（４３０～４５０ａａ之间）等位置的差异明显，可能对两个基因功能有一定影响。半定量ＲＴ－ＰＣＲ 分析表明，４ 种非生物胁迫均能诱导这两个基因的表达，但是盐、冷和ＡＢＡ 对Rt ＷＲＫＹ ３３-２诱导尤为明显，同时Rt ＷＲＫＹ ３３-２对干旱胁迫的响应更快，因此这两个基因在长叶红砂抵御非生物胁迫的应答反应中发挥的作用可能不同。本研究为深入探索ＷＲＫＹ３３转录因子在长叶红砂中的作用机制奠定了基础。
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| 关 键 词： | 长叶红砂 ＷＲＫＹ 转录因子 克隆 表达分析 |
| 收稿时间： | 2013-08-19 |
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