| β-甘露聚糖酶基因重组整合组成型表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 包晓兰,王和平,包力高,周平,蔺日胜,赵丽霞.β-甘露聚糖酶基因重组整合组成型表达载体的构建[J].内蒙古农业大学学报(自然科学版),2007,28(4):137-143. |
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| 作者姓名： | 包晓兰 王和平 包力高 周平 蔺日胜 赵丽霞 |
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| 作者单位： | 内蒙古农业大学生物工程学院,呼和浩特,010010 |
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| 摘 要： | 应用PCR方法从P.pastorisGS115染色体中扩增了GAP启动子(PGAP),大小为500bp左右,以其取代诱导型表达载体pPIC9K上的AOX1启动子(PAOX1),构建了组成型表达载体pGAP;再从野生型酵母菌JSY4染色体中扩增出25S rDNA保守序列,大小为1 700bp左右,以其取代组成型表达pGAP上的组氨酸脱氢酶基因(H IS4)片断,构建了整合组成型表达载体pGAP-rDNA。再双酶切重组质粒pT002M anⅠ得编码β-甘露聚糖酶的ManⅠ基因片断插入pGAP-rDNA的多克隆位点(MCS),获得含有目的基因ManⅠ的重组整合组成型表达载体pGAP-rDNA-ManⅠ。CaC l2法转化感受态大肠杆菌DH5α,对阳性克隆进行质粒PCR鉴定和单、双酶切鉴定。结果表明:成功构建了重组组成型表达载体pGAP-rDNA-ManⅠ,为下一步野生型酵母菌JSY4中β-甘露聚糖酶的组成型表达打下基础。
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| 关 键 词： | β-甘露聚糖酶 组成型表达 GAP启动子 |
| 文章编号： | 1009-3575(2007)04-0137-06 |
| 修稿时间： | 2007年3月10日 |
CONSTRUCTION OF RECOMBINANT CONSTITUTIVE EXPRESSION VECTOR FOR β-MANNANASE GENE |
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| BAO Xiao-lan,WANG He-ping,BAO li-gao,ZHOU Ping,LIN Ri-sheng,ZHAO Li-xia.CONSTRUCTION OF RECOMBINANT CONSTITUTIVE EXPRESSION VECTOR FOR β-MANNANASE GENE[J].Journal of Inner Mongolia Agricultural University(Natural Science Edition),2007,28(4):137-143. |
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| Authors: | BAO Xiao-lan WANG He-ping BAO li-gao ZHOU Ping LIN Ri-sheng ZHAO Li-xia |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | 25S rDNA |
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