| 施马伦贝格病焦磷酸测序检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 王彩霞,林祥梅,张永宁,吕继洲,冯春燕,袁向芬,邓俊花,吴绍强.施马伦贝格病焦磷酸测序检测方法的建立[J].中国动物检疫,2014,31(10):57-61. |
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| 作者姓名： | 王彩霞 林祥梅 张永宁 吕继洲 冯春燕 袁向芬 邓俊花 吴绍强 |
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| 摘 要： | 为适应口岸施马伦贝格病快速、准确、高通量检测需求，建立一种基于RT-PCR及焦磷酸测序技术平台的施马伦贝格病检测方法。本研究针对施马伦贝格病毒基因组RNA的S、M和L三个基因节段保守区域利用焦磷酸测序软件PyroMark Q96ID分别设计RT-PCR扩增引物及焦磷酸测序引物，以人工合成的SBV重组质粒为模板分别建立了SBV S、M、L基因的PCR-焦磷酸测序检测方法，比较三基因的PCR扩增结果以及测序分析结果，结合特异性检测结果，最终确定以M基因作为靶基因建立的焦磷酸测序检测方法效果最好，并以德国FLI提供的SBV（BH80株）RNA对所建立的方法进行验证，通过对测得序列的比对分析可确定为施马伦贝格病毒，这表明本研究所建立的方法灵敏度高、稳定性好、特异性强，可以用于施马伦贝格病毒基因序列水平上的精准检测鉴定。
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| 关 键 词： | 施马伦贝格病毒 聚合酶链反应 焦磷酸测序 鉴定 检测 |
Development of PCR-Pyrosequencing Assay for Detection of Schmallenberg Disease |
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| Wang Caixi,Lin Xiangmei,Zhang Yongning,Lv Jizhou,Feng Chunyan,Yuan Xiangfen,Deng Junhu,Wu Shaoqiang.Development of PCR-Pyrosequencing Assay for Detection of Schmallenberg Disease[J].China Journal Of Animal Quarantine,2014,31(10):57-61. |
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| Authors: | Wang Caixi Lin Xiangmei Zhang Yongning Lv Jizhou Feng Chunyan Yuan Xiangfen Deng Junhu Wu Shaoqiang |
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