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猪德尔塔冠状病毒荧光RT-RAA快速检测方法的建立及初步应用
引用本文:赵平,秦毅斌,何颖,卢冰霞,刘芳,陈樱,韦祖樟,黄伟坚,赵武,欧阳康.猪德尔塔冠状病毒荧光RT-RAA快速检测方法的建立及初步应用[J].中国动物检疫,2021,38(8):85-89.
作者姓名:赵平  秦毅斌  何颖  卢冰霞  刘芳  陈樱  韦祖樟  黄伟坚  赵武  欧阳康
基金项目:广西创新驱动发展专项资金项目(桂科AA17204057-1);广西自然科学基金项目(2017GXNSFBA198092);广西南宁市科学研究与技术开发计划项目(20202090);广西南宁市西乡塘区科学研究与技术开发计划项目(2020021605);广西柳州市科技计划项目(2020NACB080);广西大学学术骨干科研基金项目(XGZ170239);广西兽医生物技术重点实验室开放基金课题项目(16-380-45-B-3,19-50-40-B-01)
摘    要:近年来,猪德尔塔冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)给养猪业造成了较大经济损失。为快速检测PDCoV,针对病毒N基因设计特异引物,建立了PDCoV重组酶介导核酸等温扩增荧光法(RT-RAA)。通过优化引物浓度、反应温度,确定了最佳反应条件,然后进行了特异性和灵敏性试验,并与普通RT-PCR方法进行了比较。结果显示:该方法特异性较好,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪轮状病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪捷申病毒、传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒等猪源病毒无明显交叉反应;反应过程均在39℃恒温条件下完成,用时30 min即可得到扩增结果 ;反应体系可检测的最低扩增拷贝数为10 copies/μL,敏感性较高;该方法检测68份猪源病毒样品的PDCoV阳性检出率为17.6%,高于普通RTPCR(13.2%)。结果表明,本研究建立的RT-RAA快速检测PDCoV方法具有快速、特异、灵敏的优点,可用于PDCoV的快速检测和流行病学监测。

关 键 词:猪德尔塔冠状病毒  RT-RAA  快速检测

Establishment and Preliminary Application of Fluorescence RT-RAA for Detecting PDCoV
Zhao Ping,Qin Yibin,He Ying,Lu Bingxi,Liu Fang,Chen Ying,Wei Zuzhang,Huang Weijian,Zhao Wu,Ouyang Kang.Establishment and Preliminary Application of Fluorescence RT-RAA for Detecting PDCoV[J].China Journal Of Animal Quarantine,2021,38(8):85-89.
Authors:Zhao Ping  Qin Yibin  He Ying  Lu Bingxi  Liu Fang  Chen Ying  Wei Zuzhang  Huang Weijian  Zhao Wu  Ouyang Kang
Abstract:
Keywords:
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