| 心肌特异性α-actin启动子重组腺病毒的构建及其鉴定 |
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| 引用本文： | 杨玉艾,孙永科,华进联.心肌特异性α-actin启动子重组腺病毒的构建及其鉴定[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2007,35(8):1-5. |
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| 作者姓名： | 杨玉艾 孙永科 华进联 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学,陕西省干细胞工程技术中心,陕西,杨陵,712100 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划);国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 为了探讨心肌肌动蛋白(α-actin)基因启动子的心肌组织特异性及其表达活性,构建了心肌组织靶向性表达的基因载体,应用PCR从pEGFP-N1-α-actin-P质粒中克隆出α-actin启动子片段,将其插入到切除CMV启动子的腺病毒穿梭载体pAdTrack中,构建出pAdTrack-actin重组穿梭载体,经酶切和测序鉴定正确后用PmeI线性化,与含有腺病毒骨架DNA的pAdEasy-1质粒在BJ5183大肠杆菌细胞中同源重组成新的重组体pAd-easy-actin,抽提重组体DNA,经PacI酶切回收后以脂质体法转染人胚肾细胞株HEK293,包装出完整腺病毒pAd-actin进行PCR检测,并应用蚀斑形成试验测定病毒滴度。结果显示,重组腺病毒中含有α-actin启动子片段,病毒滴度为7×107pfu/mL。表明含心肌α-actin启动子的重组腺病毒pAd-actin构建成功。
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| 关 键 词： | 腺病毒载体 α-肌动蛋白启动子 胚胎干细胞 |
| 文章编号： | 1671-9387（2007）08-0001-05 |
| 收稿时间： | 2006/9/18 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2006-09-18 |
Construction and identification of recombinant adenovirus with cardiac specific α-actin promoter |
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| YANG Yu-ai,SUN Yong-ke,HUA Jin-lian,DOU Zhong-ying.Construction and identification of recombinant adenovirus with cardiac specific α-actin promoter[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2007,35(8):1-5. |
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| Authors: | YANG Yu-ai SUN Yong-ke HUA Jin-lian DOU Zhong-ying |
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| Institution: | (Shaanxi Centre of Stem Cell Engineering and Technology,Northwest A & F University,Yangling,Shaanxi 712100,China) |
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