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苹果果实中细胞质型苹果酸酶基因(NADP-ME)的克隆与表达分析
作者姓名:李明  姚玉新  刘志  翟衡
作者单位:山东农业大学园艺科学与工程学院 泰安271018(李明,姚玉新,翟衡),辽宁省果树科学研究所 熊岳115214(刘志)
基金项目:农业部“948”课题,苹果加工技术引进与应用(981057).
摘    要:【研究目的】从苹果果实中克隆细胞质型NADP-苹果酸酶(NADP-ME)基因,并且从基因转录水平上研究该基因与苹果果实酸度的关系。【方法】利用RT-PCR和RACE技术克隆NADP-ME基因,半定量RT-PCR分析该基因在高酸和低酸个体不同发育时期果实中的转录情况,并进行原核表达分析。【结果】成功克隆了细胞质型NADP-ME基因的cDNA全长序列,命名为Mal-ME(GenBank注册号:DQ280492);该基因表达一个约66kD的蛋白;半定量RT-PCR分析表明:不同发育时期的果实中Mal-ME的转录与苹果酸含量呈负相关,即随着Mal-ME转录水平的增强果实含酸量下降。【结论】成功从苹果果实中克隆了细胞质型Mal-ME基因,Mal-ME在果实发育过程中对苹果酸的积累起负调控作用。

关 键 词:苹果(Malus  domestica  B.)  细胞质型苹果酸酶  半定量RT-PCR  原核表达

Cloning and Expression Analysis of the Cytosolic NADP-malic Enzyme Gene of Apple Fruit
Authors:Li Ming  Yao Yuxin  Liu Zhi  Zhai Heng
Abstract:
Keywords:Malus domestica B  Cytosolic malic enzyme  Semi-quantitative RT-PCR
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