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猪传染性胃肠炎病毒M、N基因重组杆状病毒的构建及其口服免疫小鼠诱导抗体水平测定
引用本文:宋振辉,卿家超,冷勇,买买提·艾孜子,齐晓娟,叶翠芳.猪传染性胃肠炎病毒M、N基因重组杆状病毒的构建及其口服免疫小鼠诱导抗体水平测定[J].中国兽医学报,2015(1):5-10.
作者姓名:宋振辉  卿家超  冷勇  买买提·艾孜子  齐晓娟  叶翠芳
作者单位:西南大学荣昌校区动物医学系;新疆农业大学动物医学学院
基金项目:中央高校基本科研业务基金重点资助项目(XDJK2014B039);新疆维吾尔自治区教育厅高校科研计划资助项目(20120984);乌鲁木齐市科技计划资助项目(Y121210005)
摘    要:利用RT-PCR方法扩增猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)M和N结构蛋白基因,将其分别克隆入载体FastBacTM Dual,获得转移质粒pFastBacTM Dual-M和pFastBacTM Dual-N,将重组质粒转化至DH10Bac感受态细胞,获得杆状病毒重组质粒Bacmid-M和Bacmid-N;在Cellfection作用下,将杆状病毒重组质粒转染昆虫细胞sf9,获得重组杆状病毒rBac-M和rBac-N。间接免疫荧光试验(IFA)检测表明,杆状病毒表达的M蛋白和N蛋白能够被特异性阳性血清识别,重组蛋白具有较好的反应原性。将重组杆状病毒rBac-M和rBac-N口服免疫小鼠,收集小鼠粪便检测抗TGEV sIgA抗体水平,采集血液检测血清中抗TGEV IgG。结果显示,重组杆状病毒(rBac-M和rBac-N)可诱导小鼠产生粘膜免疫和体液免疫应答。试验结果初步预示了杆状病毒经口服途径作为抗原递呈载体的可行性,也为开展TGEV口服免疫研究奠定了基础。

关 键 词:猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)  M基因  N基因  口服免疫  抗体

Expression of M gene and N gene of porcine transmissible gastroenteritis virus by baculovirus expression system and determination of specific antibodies in orally immunized mice
SONG Zhen-hui;QING Jia-chao;LENG Yong;MAIMAITI-Aizizi;QI Xiao-juan;YE Cui-fang.Expression of M gene and N gene of porcine transmissible gastroenteritis virus by baculovirus expression system and determination of specific antibodies in orally immunized mice[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2015(1):5-10.
Authors:SONG Zhen-hui;QING Jia-chao;LENG Yong;MAIMAITI-Aizizi;QI Xiao-juan;YE Cui-fang
Institution:SONG Zhen-hui;QING Jia-chao;LENG Yong;MAIMAITI-Aizizi;QI Xiao-juan;YE Cui-fang;Department of Veterinary Medicine,Rongchang Campus,Southwest University;College of Veterinary Medicine,Xinjiang Agricultural University;
Abstract:
Keywords:
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