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CTNNB1对猪卵巢颗粒细胞的调控
引用本文:李丽莹,何颖婷,钟玉宜,周小枫,张豪,袁晓龙,李加琪,陈赞谋.CTNNB1对猪卵巢颗粒细胞的调控[J].中国农业科学,2022,55(15):3050-3061.
作者姓名:李丽莹  何颖婷  钟玉宜  周小枫  张豪  袁晓龙  李加琪  陈赞谋
作者单位:华南农业大学动物科学学院/广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室/国家生猪种业工程技术研究中心,广州 510642
基金项目:广东省重点研发计划(2018B020203003);国家现代农业产业技术体系(CARS-35);国家自然科学基金青年项目(31902131);广东省自然科学基金面上项目(2021A1515012396);广州市科技计划项目(202002030071)
摘    要:【目的】卵巢颗粒细胞的增殖和分化是原始卵泡生长启动的关键因素,卵巢颗粒细胞过度凋亡是卵泡闭锁的主要原因,因此卵巢颗粒细胞的功能对卵泡生长发育、排卵、激素分泌等至关重要。研究通过探究连环蛋白β1(catenin beta 1, CTNNB1)对猪卵泡发育过程中颗粒细胞的增殖、凋亡及类固醇激素分泌等功能的影响,为猪卵泡发育的分子调控机制研究提供参考。 【方法】利用RNA抽提、实时定量PCR(Quantitative real time PCR, qRT-PCR)等方法,构建CTNNB1在母猪卵巢、肌肉、大脑等9个组织的表达谱;检测母猪性成熟过程中卵巢组织和小(≤3 mm)、中(3—6 mm)、大(≥6 mm)卵泡颗粒细胞中CTNNB1的表达情况。构建CTNNB1的真核表达载体及合成siRNA,转染至猪卵巢颗粒细胞,采用EdU、Annexin V- FITC/PI双染、ELISA等方法,检测CTNNB1对颗粒细胞增殖、凋亡、类固醇激素分泌的影响,以及对类固醇激素合成通路重要基因转录表达的影响。【结果】与肌肉、大脑等组织相比,CTNNB1在卵巢中mRNA表达水平最高。性成熟母猪卵巢中CTNNB1转录水平显著高于性成熟前和性成熟后的母猪;卵巢卵泡中CTNNB1转录和蛋白水平随卵泡发育明显上调;且卵巢颗粒细胞中CTNNB1转录和蛋白水平也随卵泡的发育逐渐上调。更重要的是,CTNNB1显著促进颗粒细胞增殖,抑制颗粒细胞凋亡;CTNNB1能够上调CYP1A1HSD17B7的转录水平,下调CYP11A1、ESR1、ESR2、FSHR、LHRNR5A1等类固醇激素合成相关基因的转录水平,进而促进颗粒细胞雌激素的分泌,抑制颗粒细胞雄激素和孕激素的分泌。【结论】本研究证实CTNNB1可能通过促进颗粒细胞增殖及雌激素的合成和分泌,抑制颗粒细胞凋亡及雄激素、孕激素的合成和分泌,进而促进卵泡的生长发育。

关 键 词:  卵巢  卵泡  颗粒细胞  CTNNB1  
收稿时间:2021-03-08

CTNNB1 Regulates the Function of Porcine Ovarian Granulosa Cells
LI LiYing,HE YingTing,ZHONG YuYi,ZHOU XiaoFeng,ZHANG Hao,YUAN XiaoLong,LI JiaQi,CHEN ZanMou.CTNNB1 Regulates the Function of Porcine Ovarian Granulosa Cells[J].Scientia Agricultura Sinica,2022,55(15):3050-3061.
Authors:LI LiYing  HE YingTing  ZHONG YuYi  ZHOU XiaoFeng  ZHANG Hao  YUAN XiaoLong  LI JiaQi  CHEN ZanMou
Institution:College of Animal Science, South China Agricultural University/Guangdong Provincial Key Laboratory of Agro-Animal Genomics and Molecular Breeding/National Engineering Technology Research Center for Breeding Swine Industry, Guangzhou 510642
Abstract:
Keywords:porcine  ovary  follicles  granulosa cells  CTNNB1  
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