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| 猪瘟兔化弱毒疫苗株TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用 | |
| 引用本文： | 刘大伟,张小飞,胡来根,李郁,尹秀凤,毛火云.猪瘟兔化弱毒疫苗株TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用[J].中国预防兽医学报,2010,32(6). |
| 作者姓名： | 刘大伟 张小飞 胡来根 李郁 尹秀凤 毛火云 |
| 作者单位： | 1. 安徽农业大学动物科技学院,安徽,合肥,230036;南京天邦生物科技有限公司,江苏,南京,211102 2. 江苏省农业科学院兽医研究所,江苏,南京,210014;南京天邦生物科技有限公司,江苏,南京,211102 3. 安徽农业大学动物科技学院,安徽,合肥,230036 4. 南京天邦生物科技有限公司,江苏,南京,211102 |
| 基金项目： | 国家农业公益性行业科研专项 |
| 摘 要： | 为建立一种快速鉴定猪瘟兔化弱毒疫苗株(HCLV)的方法,本研究根据GenBank中登录的HCLV株基因组序列,在Erns基因序列区内设计一对引物和一条TaqMan探针,建立了检测HCLV的荧光定量RT-PCR(FQRT-PCR)方法。该方法检测的灵敏度可达3.84拷贝/μL;而对猪细小病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、牛病毒性腹泻病毒基因组扩增结果均为阴性。实验组批内变异系数为1.05%～1.84%,批间变异系数为3.70%～5.43%。通过对32批HCLV半成品抗原和9批成品疫苗,分别用经典的兔检法测定兔体感染量(RID)和新建立的FQRT-PCR方法进行检测比较,两者有较好的相关性。结果表明,该方法具有快速、敏感、特异性强、稳定性好等优点,对HCLV生产配制及成品检验具有指导作用。 |
| 关 键 词： | 猪瘟兔化弱毒疫苗 荧光定量RT-PCR 检测 初步应用 |
Development and preliminary application of fluorogenic TaqMan quantitative RT-PCR for detection of hog cholera lapinized virus |
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| LIU Da-wei,ZHANG Xiao-fei,HU Lai-gen,LI Yu,YIN Xiu-feng,Mao Huo-yun.Development and preliminary application of fluorogenic TaqMan quantitative RT-PCR for detection of hog cholera lapinized virus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2010,32(6). | |
| Authors: | LIU Da-wei ZHANG Xiao-fei HU Lai-gen LI Yu YIN Xiu-feng Mao Huo-yun |
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