| 含O型FMDVP1-2A、3C基因和EGFP基因表达盒的构建 |
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| 引用本文： | 王建科,吴国华,叶奕优,颜新敏,朱海霞,李健,朱彩珠,张强,王雯慧.含O型FMDVP1-2A、3C基因和EGFP基因表达盒的构建[J].甘肃农业大学学报,2009,44(1). |
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| 作者姓名： | 王建科 吴国华 叶奕优 颜新敏 朱海霞 李健 朱彩珠 张强 王雯慧 |
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| 作者单位： | [1]甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070 [2]中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,甘肃兰州730046 [3]深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心,广东深圳518001 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973)项目(973-2005CB523201); 国家科技基础条件平台项目(2005DKA21205-3) |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR方法分别扩增口蹄疫病毒O/China99毒株的P1-2A和3C基因,将P1-2A基因连接到pUC119载体,3C基因连接到pMD18-T载体,分别得到重组载体pUC119-P1-2A和pMD18-T-3C;将重组载体pUC119-P1-2A用HindⅢ、BamHⅠ酶切,重组载体pMD18-T-3C用BamHⅠ、NheⅠ酶切;利用酶切所得到的基因片段P1-2A、3C有共同的BamHⅠ酶切位点,实现基因P1-2A、3C的连接,构建重组载体pMD18-T-P1-2A-3C.将基因P1-2A-3C与启动EGFP表达的双向串连痘苗病毒启动子P7.5相连,构建载体p-EGFP-N1-P7.5-P1-2A-3C,并进行PCR扩增、酶切鉴定及序列测定.结果表明:试验成功构建了一侧启动表达P1-2A-3C基因,一侧启动表达标记基因EGFP的表达盒p-EGFP-N1-P7.5-P1-2A-3C.
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| 关 键 词： | FMDV 启动子P7.5 P1-2A基因 3C基因 |
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