马疱疹病毒1型SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立 |
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引用本文: | 王征,郭巍,姬媛媛,曲娟娟,赵立平,李红梅,相文华.马疱疹病毒1型SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2012,34(2):116-119. |
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作者姓名: | 王征 郭巍 姬媛媛 曲娟娟 赵立平 李红梅 相文华 |
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作者单位: | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物研究室,黑龙江哈尔滨,150001 2. 东北农业大学,黑龙江哈尔滨,150001 |
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基金项目: | 黑龙江省自然科学基金重点项目(ZD200812) |
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摘 要: | 为建立马疱疹病毒Ⅰ型(EHV-1)的检测方法,本研究以EHV-1 gB基因的一段保守区域(1207 bp~1509 bp)作为检测的目的片段设计引物,通过对其反应条件的优化,建立了特异性检测EHV-1的SYBR Green I 荧光定量PCR方法.实验结果表明:该方法检测目的基因的灵敏度下限为10拷贝/μL,比常规PCR方法高100倍;与马疱疹病毒4型(EHV-4)及其他马传染病病原体无交叉反应;组内及组间的变异系数均小于2%.该方法检测速度快及高敏感性的特点为马鼻肺炎的防制提供了有力保障,同时也为进一步开展马鼻肺炎相关的研究提供了有效的辅助检测方法技术.
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关 键 词: | 马疱疹病毒1型 SYBR GreenⅠ 荧光定量PCR |
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