| 抗菌肽NZ2114对奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌细胞膜、基因组和耐药性的影响 |
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| 引用本文： | 郭英,滕达,王秀敏,毛若雨,郝娅,范寰,王建华.抗菌肽NZ2114对奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌细胞膜、基因组和耐药性的影响[J].中国畜牧兽医,2019(4):1181-1190. |
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| 作者姓名： | 郭英 滕达 王秀敏 毛若雨 郝娅 范寰 王建华 |
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| 作者单位： | 天津师范大学生命科学学院;天津市畜牧兽医研究所;农业农村部饲料生物技术重点实验室;中国农业科学院饲料研究所基因工程研究室 |
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| 基金项目： | 中国农业科学院重大产出科研选题--饲用抗生素替代关键产品创制与产业化(CAAS-ZDXT2018008);国家农业科技创新工程--抗菌肽及抗生素替代品方向(CAAS-ASTIP-2013-FRI-02);天津市科技计划--应用复合抗菌肽提高奶牛乳房炎治疗效果的研究(18YFZCNC01130) |
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| 摘 要： | 本试验以真菌防御素Plectasin衍生肽NZ2114和奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌为研究对象,旨在阐明抗菌肽NZ2114对金黄色葡萄球菌的体外抗菌机制及其阻遏金黄色葡萄球菌耐药性的效果。通过16S rRNA基因鉴定对55份乳房炎奶样中的病原菌进行分离鉴定,采用纸片扩散法检测其耐药性,通过微量稀释法测定抗菌肽NZ2114对金黄色葡萄球菌的抑菌活性,借助流式细胞术和扫描电镜观察抗菌肽NZ2114对金黄色葡萄球菌细胞膜完整性及细胞形态的影响,通过凝胶阻滞和圆二色谱分析抗菌肽NZ2114对金黄色葡萄球菌基因组DNA的影响,将抗菌肽NZ2114与金黄色葡萄球菌共同孵育以研究抗菌肽NZ2114对金黄色葡萄球菌耐药性的影响,通过PCR进一步分析抗菌肽NZ2114对金黄色葡萄球菌携带的耐药基因的影响。结果表明,共获得10株金黄色葡萄球菌,分离菌对青霉素等9种抗菌药具有耐药性,且50%为多重耐药。抗菌肽NZ2114对10株金黄色葡萄球菌具有强抑菌活性,最小抑菌浓度(MIC)为0.5～1.0μg/mL。抗菌肽NZ2114可导致金黄色葡萄球菌S7细胞皱缩、细胞内容物泄漏,甚至细胞裂解,碘化丙啶(PI)细胞膜穿透率达5%,且抗菌肽NZ2114可与金黄色葡萄球菌S7基因组DNA结合并改变其DNA结构。金黄色葡萄球菌与1/4×MIC抗菌肽NZ2114孵育12 h后发现,除对阿莫西林和磺胺异噁唑的耐药率没有降低外,对其他抗菌药的耐药率均有不同程度的降低(10%～40%),且抗菌肽NZ2114对β-内酰胺类耐药基因(blaZ)及杆菌肽类耐药基因(braRS)的消除率分别达28.57%(2/7)和22.22%(2/9)。上述结果证明,抗菌肽NZ2114对耐药金黄色葡萄球菌具有体外强抑菌活性,其干扰耐药金黄色葡萄球菌细胞膜并结合胞内DNA的作用机制为其低耐药杀菌机制奠定了细胞学基础。同时抗菌肽NZ2114对耐药菌株的耐药性及相关耐药基因均有一定消除作用。由此可见,抗菌肽NZ2114是一种极具前景的治疗金黄色葡萄球菌引起的奶牛乳房炎的抗生素替代品。
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| 关 键 词： | 奶牛乳房炎 金黄色葡萄球菌 抗菌肽NZ2114 抗菌机制 耐药性消除 |
Effect of Antimicrobial Peptide NZ2114 on Cell Membrane,Genome and Antimicrobial Resistance of Staphylococcus aureus Isolated from Bovine Mastitis Milk |
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| Milk GUO Ying,TENG Da,WANG Xiumin,MAO Ruoyu,HAO Ya,FAN Huan,WANG Jianhua.Effect of Antimicrobial Peptide NZ2114 on Cell Membrane,Genome and Antimicrobial Resistance of Staphylococcus aureus Isolated from Bovine Mastitis Milk[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2019(4):1181-1190. |
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| Authors: | Milk GUO Ying TENG Da WANG Xiumin MAO Ruoyu HAO Ya FAN Huan WANG Jianhua |
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| Institution: | (College of Life Sciences,Tianjin Normal University,Tianjin 300387,China;Tianjin Animal Science and Veterinary Research Institute,Tianjin 300381,China;Key Laboratory of Feed Biotechnology,Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Beijing 100081,China;Gene Engineering Laboratory,Feed Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100081,China) |
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| Abstract: | Milk GUO Ying;TENG Da;WANG Xiumin;MAO Ruoyu;HAO Ya;FAN Huan;WANG Jianhua(College of Life Sciences,Tianjin Normal University,Tianjin 300387,China;Tianjin Animal Science and Veterinary Research Institute,Tianjin 300381,China;Key Laboratory of Feed Biotechnology,Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Beijing 100081,China;Gene Engineering Laboratory,Feed Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100081,China) |
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| Keywords: | cow mastitis Staphylococcus aureus antimicrobial peptide NZ2114 antibacterial mechanism elimination of drug resistance |
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