| 肉鸡Trx1和Trx2蛋白的表达纯化及其抗氧化应激效果评价 |
| |
| 引用本文： | 余文兰,胡莲美,梁柏,吴富旺,杨帆,郭剑英,唐兆新.肉鸡Trx1和Trx2蛋白的表达纯化及其抗氧化应激效果评价[J].中国畜牧兽医,2019(2). |
| |
| 作者姓名： | 余文兰 胡莲美 梁柏 吴富旺 杨帆 郭剑英 唐兆新 |
| |
| 作者单位： | 华南农业大学;佛山科学技术学院 |
| |
| 摘 要： | 试验旨在对肉鸡Trx1和Trx2蛋白进行表达和纯化,并评价其抗氧化特性。将原核表达载体GgTrx1-pET28a(+)和GgTrx2-nsp-pET28a(+)转入大肠埃希菌中进行蛋白表达;应用镍柱亲和层析的方法对该融合蛋白进行纯化;采用胰岛素还原法对重组肉鸡Trx1和Trx2蛋白(GgTrx1和GgTrx2)进行活性鉴定;通过细胞体外试验分析比较GgTrx1和GgTrx2对大鼠肝细胞BRL-3A氧化应激保护作用的影响。结果显示,试验成功获得两种重组蛋白:GgTrx1和GgTrx2,最适诱导条件分别为37℃、0.4mmol/L IPTG诱导4h和37℃、1.0mmol/L IPTG诱导4h;纯化的重组蛋白GgTrx1和GgTrx2纯度可达到90%,浓度分别达到4.0和5.0 mg/mL。重组蛋白GgTrx1和GgTrx2均具有较高的还原胰岛素二硫键的能力,并呈现出浓度效应。体外细胞试验发现,重组蛋白GgTrx1和GgTrx2均能显著降低过氧化氢诱导的BRL-3A膜脂过氧化,保护抗氧化酶SOD和CAT活性,且重组蛋白GgTrx2效果更明显。本试验结果表明,重组蛋白GgTrx1和GgTrx2均具有生物学活性和良好的抗氧化应激特性,且线粒体型Trx2为临床治疗氧化应激性疾病提供了更多可能。
|
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
