| 中、意蜂Atg12基因克隆表达及生物信息学分析 |
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| 引用本文： | 涂洋洋,武江利,吴鹏杰,谭静,于慧敏,徐进,郭岳琴,王丽华,徐书法.中、意蜂Atg12基因克隆表达及生物信息学分析[J].中国畜牧兽医,2019(3). |
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| 作者姓名： | 涂洋洋 武江利 吴鹏杰 谭静 于慧敏 徐进 郭岳琴 王丽华 徐书法 |
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| 作者单位： | 福建农林大学蜂学院;中国农业科学院蜜蜂研究所农业农村部授粉昆虫生物学重点实验室 |
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| 摘 要： | 试验旨在探究自噬相关基因Atg12(autophagy-related 12 gene)在中华蜜蜂(中蜂)、意大利蜜蜂(意蜂)中的表达差异,为探讨中蜂抗螨分子机理提供参考。参照GenBank中东方蜜蜂Atg12基因序列(登录号:XM_017048509.1)设计引物,扩增中、意蜂头部组织Atg12基因,并对其进行克隆、测序、原核表达及其氨基酸序列和蛋白结构分析,同时采用实时荧光定量PCR技术分析该基因在中、意蜂头部组织中的表达差异。结果显示,本试验成功扩增出大小为450 bp的目的片段,并表达出大小约42 ku重组蛋白;遗传进化树分析表明,在Atg12基因进化过程中,中蜂(Apis cerana cerana)、意蜂(Apis mellifera)、大蜜蜂(Apis dorsata)和小蜜蜂(Apis florea)亲缘关系较近;重组蛋白生物信息学分析显示,该蛋白的二级结构中共含有6个多肽结合位点、6个β-折叠和4个α-螺旋,分子质量约为16.13 ku,等电点为6.73;实时荧光定量PCR结果显示,Atg12基因在中蜂头部组织中表达极显著高于意蜂(P0.01)。本试验结果为后续深入研究Atg12基因在中蜂抗螨上的作用机制提供了参考。
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