基于绵羊无浆体Groel基因的PCR方法的建立 |
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引用本文: | 赵姗姗,彭永帅,王坤轮,闫亚群,菅复春,宁长申.基于绵羊无浆体Groel基因的PCR方法的建立[J].河南农业大学学报,2019,53(6). |
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作者姓名: | 赵姗姗 彭永帅 王坤轮 闫亚群 菅复春 宁长申 |
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作者单位: | 河南农业大学牧医工程学院,河南 郑州,450002 |
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基金项目: | 国家重点研发计划;国家肉羊产业技术体系项目 |
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摘 要: | 利用绵羊无浆体(Anaplasma ovis)高度保守的Groel基因,建立了快速、特异、敏感的绵羊无浆体检测方法。根据Gen Bank上登录的绵羊无浆体Groel基因序列(FJ460438),设计1对特异性引物,建立了绵羊无浆体PCR检测方法,并对其进行特异性、敏感性、重复性试验及临床样品检测。结果显示,该方法能特异性地检测绵羊无浆体,与山羊无浆体、嗜吞噬细胞无浆体、牛无浆体、边缘无浆体、吕氏泰勒虫、绵羊泰勒虫、羊附红细胞体、弓形虫基因组均无交叉反应;该方法检测下限可达到7.7×10-15g·μL-1,比文献报道的PCR敏感10倍(77×10-15g·μL-1);具有良好的重复性;对81份羊临床血液样品检测结果表明,绵羊无浆体感染率为32.1%(26/81),高于文献报道的PCR(MSP4基因)检测结果(18.5%,15/81)。
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关 键 词: | 绵羊无浆体 无浆体病 Groel基因 聚合酶链式反应 |
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