| 猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）S蛋白5′端基因重组腺病毒的构建及其免疫特性 |
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| 引用本文： | 唐芳,何孔旺,侯继波,姜平.猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）S蛋白5′端基因重组腺病毒的构建及其免疫特性[J].农业生物技术学报,2009(1). |
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| 作者姓名： | 唐芳 何孔旺 侯继波 姜平 |
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| 作者单位： | [1]江苏省农业科学院兽医研究所,江苏南京210014 [2]南京农业大学动物医学院,江苏南京210095 |
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| 摘 要： | RT-PCR扩增出猪传染性胃肠炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus，TGEV）S蛋白基因5′端包含B、C抗原位点的1.0kb DNA片段，并与穿梭载体pShuttle-CMV连接；然后与腺病毒（Adenovirus）骨架载体pAdEasy-1共转化大肠杆菌（Es-chenchia coli）BJ5183，通过同源重组获得重组腺病毒质粒。该重组腺病毒质粒转染HEK293细胞并进行噬斑纯化，获得了1株含有TGEV S蛋白5′端基因的重组人复制缺陷型血清5型腺病毒rAd-TGEV-S。随后用RT-PCR和间接免疫荧光（indirect immunofluorescent assay，IFA）检测目的基因的转录与表达。重组腺病毒rAd-TGEV-S在HEK293细胞连续传代9次后，病毒效价稳定，滴度平均为10^7.7TCID50／mL。动物免疫试验显示，rAd-TGEV-S可以诱导小鼠产生TGEV特异性IgG和IgA。
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| 关 键 词： | 传染性胃肠炎病毒 S蛋白 重组腺病毒 免疫 |
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