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一株高病毒载量 PCV2 毒株的基因组特征及序列分析
引用本文:常 鑫,蒋智勇,卞志标,徐民生,杨冬霞,杨傲冰,翟少伦.一株高病毒载量 PCV2 毒株的基因组特征及序列分析[J].广东农业科学,2024,51(3):124-135.
作者姓名:常 鑫  蒋智勇  卞志标  徐民生  杨冬霞  杨傲冰  翟少伦
作者单位:1. 仲恺农业工程学院动物科技学院,广东 广州 510305;2. 广东省农业科学院动物卫生研究所 /广东省畜禽疫病防治研究重点实验室 / 农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站,广东 广州 510640;3. 广东永顺生物制药股份有限公司,广东 广州 511356
基金项目:广州市重点研发计划项目(202206010192);广东省科技计划项目(2021B1212050021);广东省畜禽疫病防治研究重点实验室项目(2023B1212060040)
摘    要:【目的】了解广东省某猪群中猪圆环病毒 2 型(Porcine circovirus type 2,PCV2)流行毒株的遗传进化情况,丰富 PCV2 分子流行病学数据,为当地 PCV2 疫苗候选株的选用和研发提供参考。【方法】使用 qPCR 方法对疑似 PCV2 的样品进行检测,发现 1 株具有高病毒载量的 PCV2 毒株,命名为 GD222858。通过 PCR 方法进行全基因组分子克隆及遗传进化分析。使用 MegAlign 软件将该毒株 ORF1、ORF2 基因编码的氨基酸序列与 PCV2 同亚型参考毒株进行比对,分析氨基酸序列的相似性;采用 DNAStar 预测该毒株的 Cap 蛋白二级结构及 B 细胞表位,并与 4 株疫苗株 DBN-SX07-2(HM641752)、LG(HM038034)、SH(HM038027)、ZJ(AY686764)的 Cap 蛋白抗原指数进行比对分析。【结果】GD222858 毒株基因组长度为 1 767 bp。遗传进化分析表明该毒株属于 PCV2d 亚型。与国内外 82 株参考毒株的核苷酸相似性为 91.4%~99.6%,与越南毒株 Han8(GenBank 登录号:JQ181600)的亲缘关系最近。在 ORF1 编码的 Rep 蛋白处发现多个特异性突变位点 F70Y、F77L、W202R、N256S;ORF2 编码的Cap 蛋白相对保守。Protean 预测 Cap 蛋白的氨基酸第 5~18、24~25、39~41、48~49、57~65、99、101、112~114、139~140、145~150、162~165、175~181、188~189、205~211、227~232 位 置 处 均 可 能 存 在 潜 在 的 B 细 胞 表 位。GD222858 毒株的 Cap 蛋白抗原指数与 4 株疫苗株均有差异,在氨基酸 45~57、124~132、223~233 位置处抗原指数明显高于 4 株疫苗株,且与疫苗株 HM038034 差异最大。【结论】GD222858 毒株感染猪群的原因可能是 Rep 蛋白多个位点发生特异性突变及疫苗株选用不当所致。

关 键 词:猪圆环病毒  2  型(PCV2)  遗传进化分析  ORF1  基因  ORF2  基因  B  细胞表位  抗原指数

Genome Characterization and Sequence Analysis of Porcine Circovirus Type 2 Isolated with High Viral Load
CHANG Xin,JIANG Zhiyong,BIAN Zhibiao,XU Minsheng,YANG Dongxi,YANG Aobing,ZHAI Shaolun.Genome Characterization and Sequence Analysis of Porcine Circovirus Type 2 Isolated with High Viral Load[J].Guangdong Agricultural Sciences,2024,51(3):124-135.
Authors:CHANG Xin  JIANG Zhiyong  BIAN Zhibiao  XU Minsheng  YANG Dongxi  YANG Aobing  ZHAI Shaolun
Abstract:
Keywords:porcine circovirus type 2 (PCV2)  genetic evolution analysis  ORF1 gene  ORF2 gene  B-cell epitope  antigen index
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