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Hela细胞早孕因子基因的克隆与原核表达
引用本文:郑玮璐,刘为民,陈芳,王丙云,梁梓森,计慧琴,谢莹佳.Hela细胞早孕因子基因的克隆与原核表达[J].动物医学进展,2015,36(5).
作者姓名:郑玮璐  刘为民  陈芳  王丙云  梁梓森  计慧琴  谢莹佳
作者单位:1. 佛山科学技术学院,广东佛山528231;华南农业大学,广东广州510642
2. 佛山科学技术学院,广东佛山,528231
3. 华南农业大学,广东广州,510642
摘    要:为了获取大量具有免疫原性的早孕因子(EPF)重组蛋白,通过PCR技术扩增得到Hela细胞EPF基因片段,与pREST-A连接。将质粒pREST-A-EPF转化大肠埃希菌BL21后IPTG进行诱导表达,采用His标签蛋白纯化试剂盒纯化重组蛋白后,再用SDS-PAGE和Western blot分别鉴定其纯度和特异性。结果表明,EPF cDNA以正确的阅读框架插入表达载体pREST-A,经IPTG诱导后高效表达EPF重组蛋白,Western blot表明其与抗EPF抗体特异性结合。论文构建了EPF的原核表达载体,纯化获得了重组蛋白,为进一步开展EPF蛋白的相关研究和猪早孕诊断试剂盒的开发奠定了基础。

关 键 词:早孕因子  表达  纯化  特性鉴定

Cloning and Prokaryotic Expression of EPF Gene From Hela Cells
ZHENG Wei-lu,LIU Wei-min,CHEN Fang,WANG Bing-yun,LIANG Zi-sen,JI Hui-qin,XIE Ying-jia.Cloning and Prokaryotic Expression of EPF Gene From Hela Cells[J].Progress In Veterinary Medicine,2015,36(5).
Authors:ZHENG Wei-lu  LIU Wei-min  CHEN Fang  WANG Bing-yun  LIANG Zi-sen  JI Hui-qin  XIE Ying-jia
Abstract:
Keywords:
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