|
|||||
|
|
| 结核分支杆菌Rv2031c慢病毒载体的构建及其对RAW264.7细胞凋亡的影响 | |
| 引用本文： | 史梦婷,孟露萍,包海洋,付强,史慧君,王慧勤,张辉,任艳,乔军.结核分支杆菌Rv2031c慢病毒载体的构建及其对RAW264.7细胞凋亡的影响[J].动物医学进展,2015,36(5). |
| 作者姓名： | 史梦婷 孟露萍 包海洋 付强 史慧君 王慧勤 张辉 任艳 乔军 |
| 作者单位： | 1. 石河子大学生命科学学院,新疆石河子,832000 2. 石河子大学动物科技学院,新疆石河子,832000 3. 石河子大学医学院,新疆石河子,832000 |
| 基金项目： | 国际科技合作项目，国家自然科学基金项目 |
| 摘 要： | 研究结核分支杆菌Rv2031c基因对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞凋亡的影响。根据GenBank数据库中结核分支杆菌Rv2031c的序列设计引物,以结核分支杆菌国际标准株H37Rv株灭活的菌液上清液为模版,扩增Rv2031c基因;克隆至慢病毒表达载体plex-EGFP中,经酶切和测序鉴定后,获得plex-Rv2031c-EGFP重组慢病毒载体;将重组慢病毒质粒分别与辅助质粒共转染至293T细胞中,转染48h后收集慢病毒,并侵染RAW264.7细胞;侵染48h时收集细胞,用流式细胞术检测各试验组巨噬细胞的凋亡率;提取细胞总RNA并反转录成cDNA,PCR检测Rv2031c基因在细胞中的表达情况;同时,使用细胞裂解液提取细胞总蛋白,Western blot检测Rv2031c蛋白表达水平。结果表明,成功构建了Rv2031c的慢病毒表达载体plex-Rv2031c-EGFP;构建了过表达Rv2031c的慢病毒Rv2031c-lv;感染Rv2031c-lv的RAW264.7细胞的凋亡率为41.8%,而对照组EGFP-lv感染的RAW264.7细胞其凋亡率为30.0%;PCR结果表明Rv2031c在Rv2031c-lv侵染的RAW264.7细胞中高表达;Western blot结果显示Rv2031c蛋白在Rv2031c-lv侵染的RAW264.7细胞中高表达。该研究成功构建了结核分支杆菌Rv2031c的慢病毒表达载体并验证了其对RAW264.7细胞凋亡的影响,为结核分支杆菌在机体内潜伏期感染的药物研究奠定了基础。 |
| 关 键 词： | Rv2031c 慢病毒 RAW264.7细胞 细胞凋亡 |
Constraction of Lentiviral Vector of Mycobacterium tuberculosis Rv2031c and Its Effects on Apoptosis of RAW264.7 Cells |
|
| Abstract: | |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ | |