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亚麻SSR-PCR优化体系的建立
引用本文:王斌,张建平,党占海,赵丽娟,王利民,颉瑞霞.亚麻SSR-PCR优化体系的建立[J].甘肃农业大学学报,2010,45(4).
作者姓名:王斌  张建平  党占海  赵丽娟  王利民  颉瑞霞
作者单位:1. 甘肃农业大学农学院,甘肃,兰州,730070
2. 甘肃省农业科学院作物研究所,甘肃,兰州,730070
3. 甘肃省农业科学院生物技术研究所,甘肃,兰州,730070
基金项目:甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目,甘肃省自然科学科学基金项目 
摘    要:通过研究SSR-PCR反应体系的主要成分对扩增结果的影响,建立了亚麻SSR反应的优化体系,即总体积20μL,Mg2+1.9mmol.L-1,dNTPs 0.55mmol.L-1,Taq DNA聚合酶1.5U,25ng.μL-1引物75ng,DNA模板(50ng.μL-1)100ng.利用10个亚麻材料对优化后的SSR体系进行验证,1.5%琼脂糖检测结果显示,优化后的SSR体系稳定性,重复性好,扩增效果良好.

关 键 词:亚麻  SSR  优化

Establishment and optimization of SSR-PCR reaction system in flax
WANG Bin,ZHANG Jian-ping,DANG Zhan-hai,ZHAO Li-juan,WANG Li-min,XIE Rui-xia.Establishment and optimization of SSR-PCR reaction system in flax[J].Journal of Gansu Agricultural University,2010,45(4).
Authors:WANG Bin  ZHANG Jian-ping  DANG Zhan-hai  ZHAO Li-juan  WANG Li-min  XIE Rui-xia
Abstract:The factors which affected the SSR-PCR reaction results were studied in the experiment,the optimum SSR reaction system of flax was established,it was showed as follows:total volume of reaction was 20 μL,the optimum concentrations of Mg2+ and dNTPs were 1.9 mmol·L-1 and 0.55 mmol·L-1 respectively,moreover,1.5 U Taq DNA polymerase,50 ng·μL-1 template DNA 100ng,25 ng·μL-1 primer 75 ng.To evaluate the SSR system,10 different flax germplasm were used and tested by 1.5 % agarose gel,the PCR results showed that this SSR reaction system was steady and reproducible.
Keywords:SSR
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