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H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及表达
引用本文:刘仁陆,周佩娇,朱事康,任涛,戴应基,李炳清,曹伟胜,罗卓军,程珏益,郑世萍,廖明.H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及表达[J].中国兽医科技,2005,35(12):942-945.
作者姓名:刘仁陆  周佩娇  朱事康  任涛  戴应基  李炳清  曹伟胜  罗卓军  程珏益  郑世萍  廖明
作者单位:[1]惠州出入境检验检疫局,广东惠州516001 [2]华南农业大学兽医学院,广东广州510642 [3]广东出入境检验检疫局,广东广州510623
基金项目:国家科技攻关计划项目(2004BA519A46,2004BA519A12);广东省科技攻关项目(2003A20403)
摘    要:利用RT-PCR扩增了2株H5N1亚型禽流感病毒NS1基因,并将其克隆到pMD 18-T载体上,进行序列分析.结果显示,这2株禽流感病毒NS1基因核苷酸序列的同源性为70.2%,分别属于NS等位基因群A和等位基因群B.再将克隆的NS1基因插入到pET-28a质粒中构建原核表达载体,将其转化到DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞中,经双酶切鉴定及序列分析,表明获得了重组质粒pET-52NS1和pET-174NS1.经SDS-PAGE分析,重组质粒转化BL21(DE3)(pLysS)感受态细胞后,经IPTG诱导,获得了分子质量约为30 ku的NS1融合蛋白.用AIV多克隆血清做Western-blotting分析,发现来自2个等位基因群的NS1蛋白都具有较好的抗原活性.

关 键 词:禽流感病毒  H5N1亚型  NS1基因  克隆  表达
文章编号:1000-6419(2005)12-0942-04
收稿时间:2005-08-10

Cloning and expression of NS1 gene of H5N1 avian influenza virus
LIU Ren-lu, ZHOU Pei-jiao, ZHU Shi-kang, REN Tao, DAI Ying-ji, LI Bing-qing, CAO Wei-sheng, LUO Zhuo-jun, CHENG Jue-yi, ZHENG Shi-ping, LIAO Ming.Cloning and expression of NS1 gene of H5N1 avian influenza virus[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2005,35(12):942-945.
Authors:LIU Ren-lu  ZHOU Pei-jiao  ZHU Shi-kang  REN Tao  DAI Ying-ji  LI Bing-qing  CAO Wei-sheng  LUO Zhuo-jun  CHENG Jue-yi  ZHENG Shi-ping  LIAO Ming
Institution:1. Huizhou Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Huizhou 516001 ,China 2. College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University ,Guangzhou 510642 ,China ; 3. Guangdong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Guangzhou 510623,China
Abstract:
Keywords:AIV  H5N1 subtype  NS1 gene  cloning  expression
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