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重组金黄色葡萄球菌FnbpA亚单位疫苗的研制
引用本文:张海燕,杨宏军,王长法.重组金黄色葡萄球菌FnbpA亚单位疫苗的研制[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2011,39(5):39-43.
作者姓名:张海燕  杨宏军  王长法
作者单位:山东省农业科学院 奶牛研究中心;山东农业大学 动物科技学院;山东省农业科学院 奶牛研究中心;山东省农业科学院 奶牛研究中心
基金项目:山东省中青年科学家基金项目(BS2009NY002);山东省农业重大应用技术创新课题(2009);现代农业产业技术体系(奶牛疾病)
摘    要:【目的】制备金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白A(FnbpA)基因工程亚单位疫苗,并以小白鼠为试验模型,检测其免疫保护效果。【方法】诱导表达FnbpA,经组氨酸标签亲合纯化后用Bradford法测定纯化的目的蛋白的含量,并检测其黏附活性及对动物的安全性。制备FnbpA亚单位疫苗,经无菌检验及安全检验后,进行免疫保护试验,用ELISA方法检测被免疫小鼠血清中的抗体效价,通过腹腔攻毒试验检测疫苗的免疫保护力。【结果】纯化的目的蛋白在80 ku处出现单一条带,蛋白质量浓度为0.245 mg/mL。细菌黏附抑制试验发现,经FnbpA蛋白预处理过的MDBK细胞黏附的金黄色葡萄球菌数较对照极显著减少;动物安全性试验显示,小鼠注射FnbpA亚单位疫苗后均健活,表明制备的FnbpA亚单位疫苗安全性良好。所有免疫组小鼠于首免后7 d即可在血清中检测到特异性抗体,抗体效价逐渐上升,在21 d达到最高值,之后逐渐降低。【结论】纯化的FnbpA蛋白达到了电泳级纯度,且依然保持良好的黏附活性;制备的FnbpA亚单位疫苗作用机体产生的抗体水平符合抗体消长规律,且表现出良好的免疫保护力。

关 键 词:基因工程亚单位疫苗  金黄色葡萄球菌FnbpA  免疫效力  小白鼠
收稿时间:2010/10/7 0:00:00

Study on subunit vaccine of Staphylococcus aureus fibronectin binding protein A
ZHANG Hai-yan,YANG Hong-jun,WANG Chang-fa,HE Hong-bin,ZHONG Ji-feng,MA Wei-ming.Study on subunit vaccine of Staphylococcus aureus fibronectin binding protein A[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2011,39(5):39-43.
Authors:ZHANG Hai-yan    YANG Hong-jun  WANG Chang-fa  HE Hong-bin  ZHONG Ji-feng  MA Wei-ming
Institution:ZHANG Hai-yan1,2,YANG Hong-jun1,WANG Chang-fa1,HE Hong-bin1,ZHONG Ji-feng1,MA Wei-ming2(1 Cow Research Center,Agricultural Science Academy of Shandong Province,Ji'nan,Shandong 250100,China,2 College of Veterinary Medicine,Shandong Agricultural University,Taian,Shandong 271018,China)
Abstract:
Keywords:engineered subunit vaccine  Staphylococcus aureus FnbpA  immunity effectiveness  mice
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