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| 禽偏肺病毒通用型EvaGreen荧光定量RT-PCR检测方法的建立 | |
| 摘 要： | 为建立各亚型禽偏肺病毒(aMPV)的快速检测方法,本研究对aMPV 4个亚型的核苷酸序列比对分析,针对aMPV N基因的保守区域设计了一对特异性引物,通过条件优化,建立了检测aMPV各亚型的通用型EvaGreen荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法在模板为10~3拷贝/μL～10~8拷贝/μL范围内具有良好的线性关系;检测下限为10~3拷贝/μL,敏感性为常规RT-PCR的10倍。与其它常见禽类病毒无交叉反应;组内重复试验和组间重复试验的变异系数分别为0.89%～1.34%和2.01%～3.29%,具有较好的重复性。利用所建立的方法对河南省部分地区鸡场送检病鸡样品进行检测,结果显示被检地区鸡场的aMPV的平均阳性率为46.66%,与普通RT-PCR的符合率为100%。本研究建立的EvaGreen荧光定量RT-PCR方法可以用于aMPV的检测,为aMPV感染的流行病学调查提供了可行方法。 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |